脐带血CIK细胞的详细制备及培养过程 刚开始做希望大家多多帮忙

张荣华

求教脐带血CIK细胞的详细制备及培养过程

j1370033569

脐带血CIK细胞跟自体外周血培养差不多，只是离心速率及时间问题，比自体稍微大点，吸取白膜层大概能吸取5毫升左右。
: z7 C3 k! o! i( A脐带血比外周血培养时红细胞较多，后面不一定死的完。密度一般是保存在1.0-2.0*10^6个/ml左右。

pengxuleo

回复 海北 的帖子, \  D: @8 K2 m3 j) D# R6 h

. X( v0 d! l( j( H9 [6 U是可以的，CIK的主要效应细胞是CD3CD56双阳性的细胞的。但是一般情况下，都会检测一下T细胞、NK细胞等，所以就检测CD4,CD8,CD16等了

鸵鸵

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# n& J' g, g- M- e1 ]5 S5 c% a; q
& d. [7 q& a% P, i: U/ |依据我们的培养经验，6*107/ml的初始接种密度是太高了，营养达不到，反倒会产生生长抑制，我们就和外周血CIK一样1-2*106的初始接种密度，后期补液根据生长状况进行调整，增殖效果还是很好的

鸵鸵

回复 海北 的帖子5 l- _" T. s; w) q1 v) m

' _, c/ N% S0 X' bCD3-/CD16+CD56+是NK细胞的特异性标志，是要一起检测的

鸵鸵

回复 leaderhou 的帖子# x7 ~5 }6 g# W' R" h( v2 F
* ~* R& S+ j1 l' x
请教如何提高CIK的cd3cd56的阳性率呢* Z0 O% B* p6 y3 F
http://www.stemcell8.cn/thread-79500-1-1.html
/ o; b% b8 T0 S# R. }6 ^6 Y你可以看一下这个帖子，就是针对你说的这个问题的

海北

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( S* m8 g+ U3 P6 ^% c
# ~  P# u0 q! j! A8 W" y) L那为什么不只检测CD56，还要再检测一个CD16

leaderhou

回复 小刘 的帖子& g* ?) @& B1 Y. A& k
. K8 `& N" B+ `3 B' b. R; w$ h
我们养的CIK细胞的增殖倍数都很好，我甚至养过一次14天的增殖倍数到了1000多倍，但是CD3CD56的双阳率一直不高，不知是什么原因呢。我们自己做流式，也曾经送去第三方检验，流式应该没有太大问题，还是培养体系的问题。

leaderhou

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- n2 Y- r% R, R8 M* `' f
- _; ]% I9 [6 z比如100ml脐血，分离得到了1.2*108的细胞，那么我的接种细胞数就控制在6-8*107就可以了吗，我们用175cm2的瓶子接种，接种密度呢？

leaderhou

回复 小刘 的帖子" A0 C6 q4 `3 l0 c: `3 X9 u+ s
& k0 i; T" n! D4 T
6*107是一次的接种细胞量吗？6*107/ml的初始接种密度是不是太高了啊，文献上大都在1-2*106的接种密度啊