STO饲养层MMC处理后形态很诡异且大量死亡是怎么回事？

iamzhangxiaoyu

如题，P.S.我养的精原干细胞，之前发现CO2培养箱CO2浓度不准，会不会是这个原因导致的？求大牛解答，上图见附件

iamzhangxiaoyu

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6 c  Z2 S+ \9 n" S2 t  ?
谢谢你的解答，受益匪浅

w343989328

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2 B5 N) _3 F7 n$ w
MEF培养条件是跟STO一样，也难养，但是确实是因为STO长不出SSC的克隆出来。
7 c* g6 C5 k+ MMEF一般还是可以传几代的，实在不行就自己分离吧。
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PS.我自己感觉，国内做SSC的，用brinster体系的人很少，现在基本也没看见过brinster体系的文章了。反而T.shinohara的体系很高产，接受范围广。还有一点很重要的就是，T.shinohara本来就是brinster实验室出来的，他为什么不接受原来老板的体系而去开发一套新的。所以我觉得brinster体系本身就有问题。

iamzhangxiaoyu

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; m: |# f7 q; r* B, Z: ~MEF的培养条件不是和STO一样吗？之前买了一瓶回来养，后来冻存解冻发现MEF死了好多，到第二代第三代就不长了。。。

w343989328

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' {6 Z$ ^! K1 S2 W- V/ U
, r/ W8 }0 _9 h/ F# l0 h后来弃用STO了，改用MEF

iamzhangxiaoyu

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$ c  R: Q0 P2 P; z+ [那正常都是先培养STO做饲养层再铺细胞，难不成STO也要用SSC的培养液养吗？您是怎么解决这个问题的？

w343989328

这是由于换了培养基的原因，原来培养STO是10%FBS的培养基，而SSC一般都是没有血清的，特别是Brinster的体系；
% v7 V- E8 O8 O1 U) W9 `另外，如果培养的是原代的SSC，也有可能是纯化的时候没有把体细胞去干净，体细胞疯狂增殖造成的。

iamzhangxiaoyu

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饲养层都变成丝状了是怎么回事

iamzhangxiaoyu

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但是普遍情况下都是用37度培养吧

iamzhangxiaoyu

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# ~  Q. ?8 _) v" w: u: k现在的问题是不用MMC处理STO可以在体外长得还行，只要做成饲养层，形态就发生奇怪的变化，而且有很多发生凋亡的STO