求脐带血CIK细胞培养答疑

只因偶然

本人近期培养的脐带血cik细胞出现了一点问题，在第8天之前，脐血cik细胞长速还可以，细胞密度有3左右，细胞形态正常，可是第8天转培养袋之后，cik细胞就不怎么长了，密度渐渐降低，在1.0左右，而且细胞还抱团或者成絮状。无菌检测，内毒素支原体检测都无异常。培养箱co2浓度 、温度、培养基、细胞袋批号都没变。求大神帮找原因。

1233hyp

请问第八天以前，培养的容器体积是多少？会不会密度太大，抑制生长了？可以参考一下：http://www.stemcell8.cn/thread-69130-13-1.html

why77yhw

是否进行过细胞活率检测？根据你描述的现象判断，活率应该较低。不知道你用的什么培养基，该培养基能否承受细胞密度在3左右呢？！密度过高，营养会不足！还有，是否排除是真菌污染？无菌检测的方法是否足够灵敏，菌量低的情况下也有可能检测不出来。

老姜

回复 只因偶然 的帖子
6 v( y: Q2 m# w) ]  b7 B) J/ V' O+ H3 ^8 S; D7 l. ~& y6 F6 e
据经验：首先，细胞培养袋的质量很重要
: d* G% ^9 e; S- A' Z              其次，刚一转袋后添液量要少，使细胞处在相对高的浓度下，并且，每天要轻轻摇动培养袋，使聚团的细胞分散。8 e% L! Z% S5 m
        一般情况下，细胞在培养袋中扩增的不如培养瓶中快，因此，每天的“关照”更为重要

fjq729587158

可能是密度问题，密度保持在1×10E6个/mL

momoenn

细胞抱团，有絮状，这样的情况下你计数是不准确的。你可以再观察两天，看看情况会不会改善。从培养瓶到培养袋，因为环境的改变、细胞浓度的改变，细胞会有一个适应期。

只因偶然

回复 1233hyp 的帖子( M, ~" g" L! l9 K; x

! w! a4 O" h. S3 A; n6 P以前细胞密度也差不多 转袋后培养速度都正常

只因偶然

回复 why77yhw 的帖子' M: E$ f$ g" O
4 O& J5 e8 n  Y! x, l1 x% l7 L% Z9 B$ u' Q
细菌真菌支原体抗酸染色革兰氏染色都没问题，以前也是这密度，培养都正常，就这段时间后期就慢了

只因偶然

回复 老姜 的帖子6 \1 n" c3 d' t

: ~' O* O( t  c2 o  \每天上班都会轻晃拍散

只因偶然

回复 fjq729587158 的帖子
% w- h1 l' z2 D+ j4 z9 M6 S# G6 w
, X( I% s4 C  w0 V' v) b" ]' d" n以前密度也差不多都没问题，就近期转袋后变慢