脐带间充质干细胞消化，各位用的胰酶浓度及消化时间是多少？

zuishui

各位用的胰酶浓度及消化时间是多少，还有，重要的是75cm^2培养瓶，胰酶用多少体积?

rzghc

8 U! S) R( H. H5 ]) X- X! r0 z- V" u

5 U2 ?/ K* x& ^3 z4 i* R9 z0.125%胰酶，T25用1-1.5ml,T75用3-4ml,T175用5-6ml，消化时间镜下看细胞变圆了就可以终止了，差不多1min左右

yj729506

不同的培养基培养的UC-MSCs消化的时间也不同：8 N+ r0 u; D7 p# m; S" m
比如DMEM-LG+10%FBS培养3天后，用0.25%的胰蛋白酶37℃消化2-3min；
! e% `: @; k  m& B; j0 N

剡溪兰客

2 楼说的对，还可以把消化液回到37度，效果更佳好

fenglinzhu

胰酶只要能够覆盖培养皿或者培养瓶的表面就够了，没有强制要求加多少。

阿秀哥

3ml左右，37℃，消化2-3min

yanxm920

2-3ml 0.125%的胰酶就行，消化时间控制在2分钟内，不能消化太长时间，否则细胞会聚团。

cuijiaoyan

T-75瓶2.5-3mL，我们一般十厘米的皿用2mL消化，刚开始我们用0.25%的胰酶，觉得消化对细胞有所损伤，改用0.125%也可以，后来就一直用0.125%。

漾轩

0.125%胰酶,3ml/T75,3分钟，EDTA 3-5mll/T75，37度2分钟