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[请教] 求助:干细胞老化了   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-1-23 22:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
在实验室养好了干细胞,6代了,还没病毒转染,发现有老化了,请教有没有解决办法啊- h$ Z8 z# i  K, J- V0 u9 {

6 G+ O8 f3 u1 l  B* v: _还有个问题:要转染三种病毒,不知道有人有没有这类经验,三种病毒转染后能否同时三种病毒细胞的纯化
/ o/ x: L. i* @3 V' U) D, t2 _3 w( N9 L) R
多谢
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沙发
发表于 2010-1-24 01:25 |只看该作者
如果细胞老化了,说明你的干细胞已经分化。同时进行三种病毒转染,如果需要筛选出三种病毒同时转染的细胞,就必须用三种不同抗性的质粒,这样同时加入三种药物进行筛选。你可以查一下invitrogen应该有这种质粒,只需要更换抗性片段。
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藤椅
发表于 2010-1-24 21:40 |只看该作者
回复 2# gemstone 7 r7 T: N: t! Z/ a4 c6 F8 {+ O
  c" d& N  H2 l) l/ e
5 a- V* w& {8 \3 c& b8 ?
    多谢斑竹,干细胞分化了是不是意味着要重新培养了啊
* ^+ I# e; B, G% P4 I现在三种质粒已经买到,不知道同时用三种抗生素筛选的话对干细胞有没有影响
; q5 w8 G9 ^# y8 c
8 E# A& \; a5 l% D; }- P/ g) I$ |谢谢

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板凳
发表于 2010-1-25 16:52 |只看该作者
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严格来说 抗生素的影响应该是有的 但是这个都是可以忽略的 毕竟你关心的不是抗生素对细胞的影响 而是你的目的基因对细胞命运的影响,着眼点不同。毕竟很多事件不是单因素事件。
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报纸
发表于 2010-1-25 21:11 |只看该作者
什么干细胞啊?老化的这么快
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地板
发表于 2010-1-26 00:40 |只看该作者
似乎是体型越大的动物,其干细胞越不容易衰老;体型越小的,反而易衰老。转染操作却相反,体型越小的,越好转进去,越大的,越不好转进去。
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发表于 2010-1-27 17:01 |只看该作者
回复 3# icesnow 2 F* P, C7 b' m( D8 a9 l: B+ q4 n& j
; p( T8 |9 j4 G: \( a
我觉得你重新培养一下吧。 否则分化成什么细胞了也不知道。你也可以鉴定一下是不是你想要的细胞
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发表于 2010-1-27 22:18 |只看该作者
我们用的是国产的血清和抗生素,这个对干细胞的分化影响大吗?
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发表于 2010-1-28 08:38 |只看该作者
回复 8# xionghao508
5 H( [' W) D; u1 N8 U; V
5 }2 y7 P- v' M  }- e! n
) E8 I1 Q- M- x/ S' X; Z! T    血清在干细胞生长中影响很大,所以尽量选用优质血清。
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发表于 2010-1-28 23:04 |只看该作者
6代?老化?
6 m" D. I! d# e; \& q是干细胞吗?怎么鉴定的?凭什么说老化了?
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