肿瘤干细胞真的好做吗

wzx6660

楼主的说的也是我们的最大的痛楚，做肿瘤干细胞前景让人担忧，这方面研究要如何才能做点东西？才能顺利毕业呢？

leisong12

依你的条件做标志物简直是开玩笑，就算找到新的标志物了，你总得验证吧，没有流式分选你就无法确定干细胞的比例，美天尼也不是每种抗体都有磁珠分选装置。用药物富集的可能只是高表达某种耐药蛋白家族的一群细胞，用培养瘤球的方法又很难获得大量的肿瘤干细胞，也是一种富集方法，但是难以扩大培养啊。没有SCID/NOD小鼠就没有成瘤的金标准啊，况且即使用该种小鼠，也不是百发百中啊，理论上一个干细胞就能成瘤，现在能做到100数量级细胞成瘤的已算是高手了，这样就难免有细胞混杂的疑问，关于细胞污染的问题，建议用常规添加两性霉素的方法吧，也是预防真菌，还是先要彻底清理一下目前的污染状况。也不要太灰心，和你相同状况的也大有人在，互相勉励吧！欢迎讨论

xiaogao

  作为一个刚刚想做干细胞研究的工作人员，看到大家的回复还是学习了一些东西的，呵呵，都是好人啊。

小伟-虎啸龙

对于楼主的困扰，我深表同情……
+ I' o4 i7 u; P: C" g正如以上几位所述，生物实验本来就是这样让人frustrating，能坚持就一定能有所突破……
+ N* \. C3 A( l7 v  X肿瘤干细胞领域一直难以让众人相信肿瘤干细胞是存在的，因为到目前为止，只有前列腺癌、乳腺癌、脑癌、肝癌、白血病、肠癌中发现了肿瘤干细胞，其它肿瘤中还没有分离出来；我觉得要做肿瘤干细胞，拿出有说服力的结果，就是流式分选，成瘤实验；像surface marker不足以令人信服……# c1 ^, ?8 y- O' @, ]7 K, q! y
如果没有流失，也可以尝试悬浮细胞球的方法进行分选……

丁子

回复 饶冠华 的帖子
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' {4 u# i' i% N- e+ s: D+ k给了我信心

lovelysun

流失分选也存在很多问题， 并不是有了这个仪器问题就可以解决。因为肿瘤干细胞的比例相对来说很低，所以需要大量的细胞才能从中筛选出足够后续研究的细胞亚群，对抗体标记的准确性，操作的重复性要求都很高。而且流失细胞分选的人为因素也很大的，各种阈值的设定都会左右最后的结果，混杂细胞不可避免。

zhouchikai

做生物，还是找一个肯花钱的老板吧。毕竟，做生物就是烧钱。

zwcc525

楼主不要灰心，对肿瘤干细胞的Marker一直存在争议，所以我们这边索性就用最简单的sp染色流失分析癌干，但是流失分离富集的效果也不稳定。可以考虑用培养肿瘤球的方法富集，这也不是每一种细胞系都能养出肿瘤球的，需要对培养基的条件进行摸索，还有就是养肿瘤球的时候由于缺少血清细胞显得很娇嫩，容易染菌培养基消耗快，也不好伺候。我们也做得很头大，没有什么大进展。

咔啦

恼火啊，我刚刚踏进csc，还迷茫呢

ljcc

以上讨论未提到无血清培养基，流失分选富集后。可以考虑用无血清培养基培养肿瘤球，过程易受折磨。另外还要进行SCID/NOD小鼠成瘤试验才能证实是干细胞，条件差点的试验室是很难达到的。