干细胞标记的问题

lianshan87

不知有没有战友是做干细胞标定技术的或者有比较好的干细胞标定相关的文献，望大家给我推荐一下，本人的初步想法是利用原位杂交的手段利用干细胞特异性的探针做切片，从而可以显示出干细胞在组织中的位置，或者利用这一方法初步粗略估计该组织干细胞的数目~~~、' X, H7 [) [! ?4 v3 M% Q, z9 g
    不胜感激！！！

bffgbgff

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0 W. J; ]/ g3 {5 `! ?干细胞多了去了，你说的是那种？

maxiaorongqp

用GFP不就行了

yuheng

DAPI参考方法：在细胞移植前,将DAPI 以一定的浓度加入培养基中,与细胞共同孵育过夜,用PBS 缓冲液漂洗至少6 次以洗掉未结合的DAPI , 在用酶消化后离心收集细胞, 加入DMEM 培养基制成细胞悬液以备用。

foxp3

呵呵，关键是到底要做什么，是要明确动物或人体组织中干细胞（那种干细胞）的定位？还是体外培养后注射入体内追踪其定位？

lianshan87

回复 2# bffgbgff 3 o8 x/ i$ I) Z3 i, q9 G" Y" J! q7 A
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4 ~1 f3 `2 `- a3 V9 }2 ~
      我研究的是软体动物的一种，干细胞的研究在这种低等生物中非常少，也没有建成的细胞系，所以GFP也没有办法利用，根本把GFP转入细胞就非常困难。其实我想标记的干细胞可以是任何类型（生殖干细胞最好），主要是看看所研究物种中是否存在干细胞，把它标记出来甚至希望通过组织切片的方式初步看一下干细胞的数目。但我认为在这种研究背景比较浅的生物中要想确定所标记的细胞是干细胞就非常困难，仅仅用DAPI染色或者Brdu染色是不具备说服力的，所以我只能请教大家在一些高等生物干细胞研究中是否有干细胞标志性的基因，例如CD34,CD133等等，我想利用这种标志性的基因来做探针然后利用原位杂交显示干细胞在组织中的定位~~~

lianshan87

回复 4# yuheng
5 x# \: l6 ^9 x- g' N( y9 O6 T
4 [% Z6 q' C1 W+ `# W2 w/ x* E
: }8 D6 Z- J. i: L6 W    恩，谢谢，可以参考

lianshan87

回复 3# maxiaorongqp & `9 E$ o& x) f4 j
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7 R9 c8 a1 J! o; Q+ q6 m% L, `   我研究的物种属软体动物，太低等了，根本没有建成的细胞系，之前也没有干细胞研究背景 ~我目前只想寻找某种方法来从组织中把它的干细胞标记出来~ 请问您有什么建议吗？

lianshan87

回复 5# foxp3
7 [! T0 n; N. A7 ?- K; Y
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    谢谢，是想要明确动物组织中干细胞的定位，任何类型的成体干细胞都可以，当然我更倾向于专门研究一下生殖干细胞~~~

decloud2009

我们目前的研究认为，一定组织中干细胞的数量非常之稀少，可能也就是个位数级别，，lz说通过一些标记来找是不是不太现实阿。