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转帖 看到的一个好贴子 原创ye_xiangyang
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, T, T9 m: [. d" |我说说吧，主要有组织块贴壁法、双酶消化法，两种方法中我建议要是不急的话选用前一种方法，因为，操作相对简单，只是时间要长点，一般要15-20天传第一代。不管用什么方法，脐带来源无菌十分重要，操作时也要注意不要污染。% ?7 u9 M: ~( M `* X
组织块贴壁法：PBS反复冲洗脐带，特别是在脐静脉内的血液用注射器冲洗。在培养皿内顶住脐带，先用大剪刀剪成大碎块，再用眼科剪刀细细的剪成1x1mm大小的组织块，剪碎过程中不要加入PBS，这样容易点。剪碎以后均匀铺开组织块，间隔1cm即可，倒置培养皿，放入37°培养箱，一个到一个半小时取出，见组织块已经粘附在培养皿底部，延边源缓缓加入培养基，一定不要冲起组织块，要让培养基逐渐蔓延整个培养体系，再多加点，放入培养箱内，不要动，一周后上镜看，如果有细胞沿组织块边缘出现你就赢了，可以以后间隔3天换液了，等到组织块周围细胞呈集落生长，可以传代了。
^2 P( J$ L, `/ g0 x) T' |$ D浅见，我培养过。挺成熟的技术，望成功。 |
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发表于 2010-4-12 21:16
发表于 2010-4-21 14:58
