想请问胰酶消化细胞大概都是多长时间？这个度怎么把握？

caoyue

想请问胰酶消化细胞大概都是多长时间？这个度怎么把握？

奇幻雪蓝

米兰小镇

MSC我们是37℃消化（3-5min），显微镜下观察贴壁细胞形态变化，当贴壁msc胞质回缩，细胞间隙不断增大，细胞呈近球形同时有少量圆形细胞脱壁时，终止消化
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alex19901

现在这个天气的温度，你可以再显微镜下观察消化情况，纤维状细胞从壁上脱落，变圆即可，而且当绝大部分细胞脱落时，需要终止消化。

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具体消化时间根据胰酶类型和胰酶浓度而定，一般镜下观察大部分视野细胞近圆形，少量细胞漂浮；细胞较均匀的消化为单个细胞说明消化效果较好

15225119792

回复 caoyue 的帖子7 \1 W) A& }* l+ T5 W* F+ m/ ~' X

" m) X6 h; b9 K* E2 ?5 `9 X5 ]: u从加胰酶到加终止液，不超过3分钟，时间长了对细胞有影响

caoyue

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. k( C' c2 j- _6 @( Y' Q# y第一天观察漂浮的细胞很多，是不是胰酶消化时间过长，还是没有震荡好。

caoyue

回复 alex19901 的帖子. U3 E* G) H7 \2 }. P
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第一天观察时，贴壁细胞很少，漂浮的死细胞较多，是不是消化时间过长？还是没有摇晃均匀？

a1249471827

应该是消化时间长了，或者是胰酶浓度比较高，我们实验室用的胰酶是稀释1倍，即0.125%浓度的

a1249471827

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, C/ ?+ B. a& f! c3 y. O- w1 v& U你好，你说的消化法我用过，这个时候在显微镜下仍有大量细胞在培养瓶上，吹打之后依然观察依然后细胞在培养瓶上，培养瓶上的细胞就不能要了，算做正常的损失，是吗？