小鼠BMSC原代培养经验交流贴~~

tanhehe1006

回复 10# china1983chen ! U# t* r7 v/ }% A3 J% w+ \
  Q1 V7 U# F  X( N
; r- X0 _0 T6 B( g! ]
    是原代，是p1的照片

tanhehe1006

回复 9# jisuyun
0 o) S: g! H; q" A! q) ~9 e$ E- D. A! _6 J1 O

7 O* Y0 ?4 ^1 L8 ?8 W" L    你提的这个问题很好，但是形态是不能说明问题的对吧。我完全复制我上边发的一片用骨片养的方法，你看看这篇文章吧

china1983chen

/ T# }7 s1 X1 o( Z; B( g

: {7 D9 X0 `) V. Y) ]8 N* q" i" Y回复 9# jisuyun $ K" L' N6 ?: l0 v
: u- C2 w% ?: h9 ^; m
$ Z1 r# t: G6 ?1 l8 h5 ?' B
    这个就是MSC把，成纤维细胞不是这个样子的

烂桃

回复 7# tanhehe1006 4 ?3 @; |  K0 A0 m, A
% a: u& G! H; x: F! N
! J' W% o9 Q$ }2 t' t& K- o( }. H
    这是原代吗，好像不是很有活力

烂桃

回复 1# angel-sakura 0 E/ p# p7 n! U1 {  A8 U9 z1 i: X

* a+ q) d( p( ^  r1 Q. R, G" Q& v+ T+ G- i
    一般取股骨吧，在细胞室外剔除肌肉，泡酒精几分钟，剪断两段冲出骨髓，可以离心也可以不离心，我做的一般是离心后重悬接种，培养液用α-MEM或DMEM\F-12都可以，我个人感觉DMEM\F-12好一些，原代可以用15%FBS，传代10%就可以了，我一直在做不同动物的BMSC，形态都不错

jisuyun

回复 12# tanhehe1006   }: J7 J2 m, N! O9 J5 _9 R+ Z; m) e

$ X, g9 t4 v; Y! Z' u: B+ O: u
( [6 y7 ]  E- B2 H    我是新手，刚做实验。昨晚下了你那两篇文章，刚才看了一下中国的那篇密质骨培养的方法，也想尝试一下。不过胶原酶还没买。我的血清也是GIBCO南美血清，并不是他说的专用于MSC培养的血清，培养基是L-DMEM。你用的血清、培养基是什么？
* G/ N2 t9 q  m- F问个问题：37度孵箱200rpm摇2h是怎么弄的？是摇床吗？200rpm怎么定的？

jisuyun

tanhehe1006 版主你qq多少？我们交流一下。

kqyy

1mL注射器太小,伤细胞

jisuyun

如果按那个IRAN人写的protocol，8h就换1.5ml液，一直到72h，会不会因为老是去动它而不好？有没有人用这个方法养的？

angel-sakura

回复 18# kqyy
3 }$ _# S* n7 W" B/ X. B! G8 b请问你是用多大的注射器？小鼠的骨头很小，我觉得1ml注射器能刚好冲骨髓，不知道大的注射器能不能冲？