小鼠BMSC原代培养经验交流贴~~

tanhehe1006

回复 16# jisuyun / W$ d* D+ l% m* r% |

: J0 |& U5 R" M" W* ~# k2 h: _+ k我用的是α-MEM，Hyclone的胎牛血清。消化就是用摇床，不过是可以调温和调速的

angel-sakura

回复 30# tanhehe1006
! H' V# s3 y1 A' S1 D& H我本人没做过，但我学姐做的时候是选的CD44和CD45,还有一个不记得了，不过这些论坛上好像有，你搜搜看。你养的BMSC状态怎么样？我听我导师说骨片法的话BMSC可能状态不会长得很好，因为刚从体内分离出单一的BMSC，环境变化很大，且与其他细胞之间的相互作用突然消失了，推测BMSC可能会过早老化，或者影响到其分化的能力。不知道你们有没有考虑到这个niche的变化。

碧海蓝天

我觉得分离出来的股骨胫骨等没有必要用酒精泡，操作时注意无菌就行了，用两套手术器械就可以。前面的细胞图片挺漂亮，相机不错。要不就是成像系统照出来的或是Olumpus的单反机相相照的，细胞增殖到一定程度就是梭形的了，排列整齐。干细胞总的来说还是比较好培养的。就是传代时胰酶消化不要太过，保证细胞活力为上。

jisuyun

我们的摇床怎么只有转速，不能恒温。
4 X: I- o  k3 l: C( {8 L放在室内二十多度可以吗？
* {5 X4 O% d/ i9 @+ R我上次的那个圆圆的细胞渐渐飘起来很多，梭形的细胞越来越多了，很开心。2 G8 m: [) a" o$ w' J/ ]
如果可以，晚上放图片。

missyoudad

学习了。

Jocelyn

回复 7# tanhehe1006 2 I6 |0 A+ {" _. T; J
( q# L* x& p, R0 N

& Y) [* U5 ^8 M     你的BMSCs细胞长的很诡异啊~~形态不对吧???
( i( {9 K/ ~$ `3 b     你分盘时的密度低了吧~??1比几传代的??2 O2 h0 g6 D6 T( x8 ?$ D6 @
     细胞第几代了??

红色贝鱼

恩，我要第一次养原代，来参考一下

baiyumeng

学习下

lipenix

这个很好，学习了！

_然然

回复 angel-sakura 的帖子+ X5 I1 g' B* w4 \9 Q2 {$ c

, P6 e9 w+ U2 ~2 t3 _7 Y0 ?5 f# Z; e请问 取股骨胫骨后是不是需要把肌肉去的很干净还是只要两端没有就可以呀？