小鼠ESC培养过程中如何鉴别细胞分化形态

dilal

我是一个刚接触ESC培养的新人，对于小鼠ESC分化及未分化的细胞形态一直很朦胧，希望哪位高人指点一下如何区分。
; S; l9 J/ |+ m( `5 @0 w0 {1 B另外传代后的细胞生长是否良好如何通过细胞形态来进行判断，漂浮细胞形态是什么样的，请指教，如果有图片更是万分感激了

juan880929

干细胞集落紧密，成三维状，细胞表面光滑、是圆形，如果 细胞贴壁后后不圆了，那就说明分化了，形态好的图片文献中有很多，自己看一下就行了，传代后，漂浮的细胞都是死细胞，刚接种上的活着的干细胞应该周围比较光亮，细胞圆形，表面光滑，

maozhuxiwo1

借这个帖子问问，MEF密度高和低两种状态下，分别有多少个ES啊？  ; l4 x; g( Y. F$ K9 u% d# Y
最佳饲养层的时候，会有多少个克隆啊？: @. P* ^& N$ R# y8 k  ]4 c: i3 ?& a
求教具体数字

恋水鱼

细胞分化以后 中央是密密麻麻的 周围是正常的干细胞 。如果是未分化的细胞 整个都是匀质的。

周会

细胞分化后就不是克隆性的生长了，而是形成单层，可以看见一个个的细胞，如果没分化正常情况下是看不见单个细胞的ESC的，刚接种的ESC悬液中，细胞体积较小，周围比较亮！

dilal

回复 2# juan880929
  @& @( {% d7 Q/ A  I" H! f2 e/ a" o: O
, D* J& ]* [  j
太感谢了，学习了，看来以后还得多留意留意

dilal

回复 4# 恋水鱼 : O  \" ?7 s* H
* g) @6 N! }! f7 k$ U& B; m( F
  b. m3 ~+ G, a, I% D; r
    谢谢，收获匪浅

rhmm

你养的是什么细胞，要是神经幹細胞的話應該是圓形透明的，聚集成球後應該就是一個個懸浮的細胞團塊，倒置顯微鏡下可見緊密排列的細胞，但要注意跟組織塊相區分

梦想lab

我觉得还是AKP染色那个方法更好些，lz可以试试染色观察下，也就熟悉了未分化状态

show0ji3

基本看情况，你看那个团块是不是圆滑，不圆滑了就是周围分化了，要是集落中心有黑色的现象，那中间的细胞还是不要的好，机械传一下。分化的和不分化的很好区分。