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楼主: smkx
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贴壁培养神经干细胞   [复制链接]

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发表于 2010-9-19 16:55 |只看该作者
回复 10# 深海寂寞鱼 5 x" _# p" x0 V$ W
' l, ~1 k7 o3 b* A8 [& e

! N" z( o9 D5 Z, ]   我准备用FBS+LIF的方式贴壁培养胎鼠的神经干细胞,因为悬浮培养的时候死细胞太多。几乎都死了。1 P' y4 B% j* d) z9 `1 z
   另外我有个问题,胎鼠的部分脑组织在体外打散后会自行裂解以至消失吗
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发表于 2010-9-19 21:11 |只看该作者
very very good!

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发表于 2010-9-19 21:18 |只看该作者
血清能诱导干细胞分化,为什么要用尼.

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发表于 2010-9-20 08:22 |只看该作者
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恩,好的,非常感谢啊

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发表于 2010-9-20 11:02 |只看该作者
我个人也觉得悬浮培养神经干细胞真的很麻烦,包括传代,换液等都很麻烦的,而且神经干细胞球不容易消化,球体中间的细胞很容易老化。我也想试一下贴壁培养,另外就是想问下各位,你们是用什么酶消化干细胞的?大家的神经干细胞能传几代?谢谢!
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发表于 2010-9-20 20:58 |只看该作者
回复 4# 深海寂寞鱼 5 u1 [: v5 W/ P6 X: _2 M* ~0 `( U
7 \+ Q/ }2 _: s$ e( K

9 k0 {# n& d! I( C( I    可以用poly-lysine包被的培养皿养吗?你这里说的方法和下面提供的文章里一样吗?另外关于换液等方面有什么要点需要注意的吗?
8 e' B" @) L( W& f5 K    最近本人也在摸索贴壁培养NSCs,不知道用你的方法细胞可以传多少代?
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发表于 2010-9-20 21:00 |只看该作者
回复 2# iseeyou1210
* N1 m+ k+ q. }5 W$ |/ U) B$ o( g
3 ?; W% ]4 i1 l" j& r你好,不知道你贴壁培养NSCs的protocol要到了吗?很期待哎

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发表于 2010-9-20 21:43 |只看该作者
看来楼主问题非常值得关注,顶

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发表于 2010-9-21 13:14 |只看该作者
回复 11# smkx 3 s( B( y8 o+ e( s; X
7 b, V! m  k4 q, F+ {
to smkx兄:, ?) L' T4 }) z: }! ~$ G
6 |# p0 j1 t" C! K2 N/ L+ L/ ]9 y
  1.  关于你提到的FBS+LIF的方法我一点都不了解,所以帮不上什么忙。0 t* v3 Z/ _) b# E- e5 @
9 p- M0 ]4 T% J) G1 @8 v1 X$ n
  2.  关于你问的部分脑组织的问题,在FBS+LIF条件下会怎样我不太清楚。+ Z& W- L; A6 G, o" n# r
  
0 G7 V2 F: r* G4 C% E       但是在悬浮培养和Laminine包被的贴壁培养条件下,你提到的部分脑组织会慢慢死亡、崩解,随着传代这部分组织在培养物中的比例会越来越少。大致的原因是无血清培养条件下,多数已分化细胞不能存说或者说不能长期存活。+ i/ T" f) I- Y, ~

8 P, u0 t4 p. b) Z0 J2 L* E- z  不知道我的回答能解决你的疑惑不?  如果有问题我们继续交流。
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发表于 2010-9-21 13:16 |只看该作者
回复 18# smkx
% S2 b6 Z9 b  O- _8 f1 H
% }1 K# I# U- a0 L
8 J: O' E1 |9 h( J/ x1 b    呵呵,你不就是楼主么?哈哈。。。。。。。。) M4 c2 J" O6 \0 B$ M1 c
& ]9 ?! Q2 X; q2 ~* A
    不过你提出的这个话题确实十分好。
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