病毒包装质粒的比例

上官鑫

请教pMXS-DNA,pUMVC,pCMV-VSVG用293T细胞包装时的这三个质粒的比例。谢谢

daviddow

20ug:15ug:6ug in a 10ml dish

164ly

不知道你要包装的是什么病毒。( i" H# Q0 M8 o4 E: v
但不管是哪种，各种质粒的比例都会影响到病毒的包装，公司一般都是把这几种质粒做成mix形式，不告诉客户的

上官鑫

回复 3# 164ly
; g9 l, d8 c5 R* m
1 {7 M; R  @6 U& p" F' C) h% N+ z* [; d7 x: s9 U$ l9 G$ ^
    Retrovirus

上官鑫

Hi daviddow,
, T$ {, c# @* t& h5 }$ T! ~2 H20ug:15ug:6ug in a 10ml dish
* ]9 U6 L2 d$ l. v; S- gDNA量会不会太多了啊？不是10cm dish最多转20ug DNA吗？这样加起来都41ug了。

exin11

我们用的是10：7.5：5

上官鑫

我在想pUMVC是low copy的，提质粒的时候，在DH5a都表达很低，会不会在293T细胞中表达也低，所以这个质粒DNA要不要多加点。

上官鑫

怎么突然没有发短消息的权限了。

wuxiao101325

回复 1# 上官鑫
. g. v4 V  o' n: Y请问楼主你们实验室做iPS的addgene公司的质粒怎么购买的？

上官鑫

直接在公司购买啊，我们实验室有专门订东西的，订单交给她就可以了，那个好像要shift费。