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病毒包装质粒的比例 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-9-24 01:03 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教pMXS-DNA,pUMVC,pCMV-VSVG用293T细胞包装时的这三个质粒的比例。谢谢
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2010-9-24 19:15 |只看该作者
20ug:15ug:6ug in a 10ml dish
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藤椅
发表于 2010-9-24 19:50 |只看该作者
不知道你要包装的是什么病毒。! v4 Z! r& t2 g9 U% |
但不管是哪种,各种质粒的比例都会影响到病毒的包装,公司一般都是把这几种质粒做成mix形式,不告诉客户的
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板凳
发表于 2010-9-25 02:53 |只看该作者
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回复 3# 164ly $ N' M$ V: O7 m+ d2 v( m
- k; d% H1 i2 Q: \0 \& K

0 f: C3 ]: P1 }$ L3 N    Retrovirus

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报纸
发表于 2010-9-25 09:05 |只看该作者
Hi daviddow,0 ?% P( N# ^6 P. P$ t4 Z; T, J
20ug:15ug:6ug in a 10ml dish* h+ c* f, {$ k; z4 ~. q7 w
DNA量会不会太多了啊?不是10cm dish最多转20ug DNA吗?这样加起来都41ug了。
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地板
发表于 2010-9-25 10:54 |只看该作者
我们用的是10:7.5:5
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发表于 2010-9-27 00:28 |只看该作者
我在想pUMVC是low copy的,提质粒的时候,在DH5a都表达很低,会不会在293T细胞中表达也低,所以这个质粒DNA要不要多加点。
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发表于 2010-9-27 00:44 |只看该作者
怎么突然没有发短消息的权限了。

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金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员 热心会员

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发表于 2010-9-27 09:54 |只看该作者
回复 1# 上官鑫
6 k1 O% H& P: J1 }/ |1 ^2 w: _请问楼主你们实验室做iPS的addgene公司的质粒怎么购买的?

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发表于 2010-9-27 11:02 |只看该作者
直接在公司购买啊,我们实验室有专门订东西的,订单交给她就可以了,那个好像要shift费。
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