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病毒包装质粒的比例 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-9-24 01:03 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教pMXS-DNA,pUMVC,pCMV-VSVG用293T细胞包装时的这三个质粒的比例。谢谢
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2010-9-24 19:15 |只看该作者
20ug:15ug:6ug in a 10ml dish
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藤椅
发表于 2010-9-24 19:50 |只看该作者
不知道你要包装的是什么病毒。; d6 ]" @$ P( D% J5 s7 n6 F& `
但不管是哪种,各种质粒的比例都会影响到病毒的包装,公司一般都是把这几种质粒做成mix形式,不告诉客户的
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板凳
发表于 2010-9-25 02:53 |只看该作者
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回复 3# 164ly
" ^! C- g( ]! C
; U+ I3 J5 ^1 G" q8 I9 V
) \' [0 i) a0 I$ _; p, V% v    Retrovirus

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报纸
发表于 2010-9-25 09:05 |只看该作者
Hi daviddow,
% M1 D5 ~; }& z6 ]20ug:15ug:6ug in a 10ml dish
; V5 r( t' d* q% T" J; m- UDNA量会不会太多了啊?不是10cm dish最多转20ug DNA吗?这样加起来都41ug了。
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地板
发表于 2010-9-25 10:54 |只看该作者
我们用的是10:7.5:5
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发表于 2010-9-27 00:28 |只看该作者
我在想pUMVC是low copy的,提质粒的时候,在DH5a都表达很低,会不会在293T细胞中表达也低,所以这个质粒DNA要不要多加点。
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发表于 2010-9-27 00:44 |只看该作者
怎么突然没有发短消息的权限了。

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发表于 2010-9-27 09:54 |只看该作者
回复 1# 上官鑫
( l5 Y7 g2 y( Q# \请问楼主你们实验室做iPS的addgene公司的质粒怎么购买的?

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发表于 2010-9-27 11:02 |只看该作者
直接在公司购买啊,我们实验室有专门订东西的,订单交给她就可以了,那个好像要shift费。
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