请教一个关于病毒的问题

snokey

1。一直用-80度冻存的Retrovirus诱导iPS，没有用过冻存的lentivirus，不知道lentivirus效果会不会更好些？
# i  J; K2 c0 e( ^' g4 {+ o2。冻存的病毒肯定不如新鲜的，但是我没有做过比较，不知道到底会有多大差别？# [' n7 `9 F9 a. P
3。我现在每次使用的是没有浓缩的病毒上清，病毒感染两次，第一次感染3天后做QPCR测到total Oct4 mRNA的表达量（内源+外源）是未感染Oct4组的220倍左右，不知道这个倍数算不算低？

大刀无敌

1冻存的病毒也可以诱导，但是效率很低，建议用新鲜的做。& F: _8 d; |5 j# \5 S
2有一个问题不明白，没有感染的mef怎么会表达oct4，所以对你说的220倍我没有一个直观的认识到底是多少，还有诱导第3天是检测不到内源oct表达的。

snokey

谢谢楼上的。$ S( z: `$ g7 I5 b0 z. p% R- K
不好意思，第一个帖子没有说清楚，我用的是人的脂肪干细胞(HADSC)来诱导iPS，脂肪干细胞又内源的Oct4表达，比普通的fibroblast高。我说的220倍就是 Oct4感染后的HADSC中Oct4 mRNA/未感染的HADSC细胞中mRNA

cicadacjk

retrovirus是有包膜的病毒，冻融会损失90%以上的活性
) X9 l2 r; C6 D1 l建议四度或室温保存，三天内用完。; I) `2 h: |* e/ u% f
/ }2 h, Z1 y) d9 ~$ a# G
lentivirus超速离心后可以稳定保存在-80度