神经干细胞的传代吹打是否吹达成单个细胞

xiaodiao123

大家在培养悬浮生长的神经干细胞的时，尤其是在其形成神经球的时候，究竟是要吹达成单个细胞，还是只是把球稍微吹打一下，只变小就可。现在我们实验室有争论，说在传代时吹达成单个细胞，细胞特别容易分化。我现在也搞不清楚了，希望大家给指点一下，如果有相关的文献的话，那在这里先谢谢了！

xfyang2007123

你是直接用吸管或者加液枪直接吹打的，还是先用酶消化再吹打的？我感觉直接吹打很难成单个细胞，而且吹打后容易死亡!另外据说吹达成单个细胞反而不容易成活,可以吹打成小的神经干细胞团即可！不知楼主你们那里情况怎么样，成单个细胞容易成活吗？

xiaodiao123

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$ S. d' S' A, H( J  S6 ?) x  Q
) ?( y" E  R( b( c成单个细胞倒是也容易活，这些都没有问题。我们是先离心然后用枪尖吹打的（离心管底部也就剩1毫升的液体），这样就比较能吹打的开了。

xiaodiao123

自己顶顶

have-a-rest

神经球的话，就是吹打，大集落变小集落，单个的话就分化了。

平平淡淡

我是吹成单个细胞的，但是传代后细胞很难再形成较大的球。养养就贴壁了。那么请问如何吹成较小的球呢。每次吹打后部分细胞成单细胞部分神经球还是很大，很难吹小。

平平淡淡

回复 have-a-rest 的帖子' _6 V1 v# s6 M
4 G& D! G0 ]( C1 V  h
请问具体拿什么怎么吹打？我养神经干几个月都不能传代，没有传代细胞所以实验没法进行下去，很是郁闷。可能就是因为吹打问题，我每次都是拿5ml大枪头吹打。希望高手指点迷津，万分感激！！！

junjunxu

首先用酶消化，注意消化的时间，如果消化太过的话，细胞也容易死掉；消化后在用枪来吹打，吹打时也要轻一些；通过上述二步是可以离散为单个细胞的。 3 U3 q9 L2 O8 ~, {

jennyshy

吹成单细胞

xfyang2007123

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+ s  N$ s7 c' B5 l
+ a; t$ y1 N" s) I/ K* m同感，请问你们是不是用的原代直接进行后面的实验呢？