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本帖最后由 深海寂寞鱼 于 2011-4-24 23:20 编辑 + h- X( K& x# g+ r% H, H) j8 P
4 U$ C* H" O- P4 q; p: ?/ J- w回复 龙之吻 的帖子
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a( [7 K- `; ? u1 E) kto 龙之吻 :
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) A* F' ~; s' I3 j# G" {# \/ S# J2 R( O) c% i
第一个问题：* z4 K' \3 [3 ?6 K* Y
2 J) G( b- c. X0 u# n 没有太明白，你说的“传过好多代的肺癌细胞”具体指什么？是指商品化的细胞系？( S" q# A" e, s% y+ x* w
% v1 g) G( k: z3 n
还是自己实验室做的原代细胞培养物？
* v' f8 o/ z+ ]& p) \. |3 b
1 d( X2 B; s: m1. 如果是商品化的细胞系，你就需要查一些文献，看看这个细胞系有没有被用来做过肿瘤球形成实验。同一种肿瘤的不同细胞系，有些能形成肿瘤球，而有些则不能。不可一概而论。
0 f. C! ]* p- E, Q
, I* d5 N# K0 F4 _( u+ G5 U# S' A2. 如果是你自己的原代细胞培养物，那你只能养在无血清培养条件下，自己进行尝试了。
7 F3 n: Y! B" [" w7 O; g& P如果不尝试，谁也不敢冒然回答你这个问题。2 i7 ^, g& R6 s: P
% e" t) @) n3 S4 x; x, W0 _
提示一点：能形成肿瘤球也未必就能说明这个细胞一定适合用来进行肿瘤干细胞相关研究。$ S$ W$ U) F7 C$ o) j1 u
" G; I! P' u- j0 {0 @
第二个问题：
6 U' ~6 Z5 ]% c8 B, P5 q- Y( U! s [" N# ~" @! ]' }
国产六孔板是不能起到超低粘附板的作用的。因为国产普通的六孔板没有经过后处理。
+ a. T- @, p+ F+ S8 ?% h( S专门的超低粘附板表面是经过一些特殊处理的，比如亲水性处理。* s/ L+ f9 M9 m$ i7 d9 g
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但是国产的六孔板是可以用来养肿瘤球的，会有一些细胞或者比较大的肿瘤球贴壁。$ }# y8 e- Q- h+ r& c; U
4 ? ~) n" ~0 |* `* M第三个问题：
& a) ^6 q D) i/ d
0 t' d/ P! R3 ~, L; G" q! s0 `胰酶-EDTA消化确实会损伤细胞膜表面，因为胰酶本身就是一种蛋白酶。% z+ a& t; I& I( ~8 V/ \( B
如果经济不允许，胰酶-EDTA是可以用的。只是传代后细胞的存活率会略低一点。# S3 N5 G: N" y
条件不具备的话，不用过分追求非要用Accutase等消化液。- W- J: n* }/ D- C' n: s1 V0 b$ D
]3 m' B' {8 P. H% P5 G( `
- l; m9 O6 |5 D) w! G1 r希望这样回答能对你有些帮助。欢迎继续交流。9 q( r: I8 d& y2 F! {
4 D5 T% ]# q5 m
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发表于 2011-4-24 23:18
我的细胞是实验室的一个教授好多年前经有限稀释分离得到的，不过我们有传过好多代了呢，初步试了下能成球，不过没鉴定。那corning的超低粘附板能重复用吗，就是我用完后泡酸再去钴源照射？
