pri-miRNA的超表达能用pEGFP-C1吗？

runsong

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3 O, j5 q) @* r6 F
/ ~5 z% K4 ~0 f4 C, B谢谢你从前的指点，一个多月前我按照你的方法把载体建好了，定量PCR显示34c上调了9倍（以5s为内参，34c与5s的Delta Ct由9.9上调为6.7），现在正在进一步探求34c诱导的效应。
& Z5 b- ~0 l- m: G不知你们照此法得到的结果如何。
- b( T$ g8 g1 e, f7 O

深海寂寞鱼

回复 runsong 的帖子6 C/ C5 ?2 M" z- V
- _0 W1 N+ R7 b  _
恭喜你啊。
) {/ q4 G" X5 H不知道你是做的顺转还是稳转？
! i) V5 |/ k1 m: {7 [$ e2 C我们通常都是做的稳转。不同克隆间的表达水平略有差异。
0 G1 [- C3 G1 j; H) N9 R" ^一般都是几倍到十几倍。
  k) F$ B2 p9 j5 i' S所以好像和你的结果差不多。

sannia

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- e" ^1 e5 V( S: b8 Z
& S4 ~$ m/ k$ k( p你好，我最近也要做这方面的载体。0 X. C( }5 I+ b7 ~/ R. q
不知道楼主能不能共享一下质粒的序列，我看看GFP与primiRNA的之间连接序列

runsong

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) j- L9 o7 g& v7 }! O- E: n; ?3 @# \8 B* N6 u
我做的是瞬转，转染效率约为60%，转染后3天收样。你们那里还有做稳转的吗。

runsong

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' `6 h$ K( u+ @# u7 ^
( ?/ N2 A5 Z7 P7 z! Z# a我是按照深海寂寞鱼的方法做的，附件里有全部资料，不清楚的话再联系我。

runsong

附件

sannia

感谢之至！

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用
; ?0 L( g# {) U以后多交流

runsong

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& G$ U/ ^3 h; ^0 B0 H8 Y# O以后多交流

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以后多交流