关于油红O染色

gqs2872022

1.染色的工作液现配现用，不宜久置。- h9 k6 W3 u& L" J. ]) `
2.建议过滤工作液，能减少杂质使染色变得更好看。
/ Q, d# m8 P1 d7 d3.染色前需加60%异丙醇5min。$ n5 C; ]% v8 p, ~7 |# ]" a$ B
4.染色时间15~20min。
- ^7 C) |6 M. P5.水洗，60%异丙醇分色，时间要恰当，不宜过久，过久估计全部都会掉。9 I; n0 G4 J' n% R* W) r3 g* G: ?
6.苏木素复染可要可不要。

why121

最近也在做这方面的染色 根据成品说明书是用4%的多聚甲醛固定30min 然后PBS洗后 用3:2稀释的油红染色 但本实验室的显微镜不好 照的相感觉很差 想请教下你们用的是倒置显微镜多少倍还是用一般的光镜呢

zgzjhzxyj

油红O 0.5g 溶于100ml异丙醇中作为储备液,避光4度保存，用的时候油红O储液：蒸馏水=3：2的稀释。! S* W, i# c5 v. a: ^; G, Z% O
步骤2 j# \# I% g% W+ s
1、固定：吸弃培养液后加入95%酒精固定30min或以上+ t% N* \+ D. p+ F5 U+ f
2、漂洗:吸弃固定液，PBS漂洗1次
: j- S2 @+ b' `( @9 q5 b3、染色：加油红O染液染色10-60min
$ P7 V8 f/ L$ L: i, J& ~. |: P4、漂洗：吸弃染液，PBS漂洗3次，尽量把背景洗干净，避免色素沉着
% q( L! b3 V( R2 h- v, r5、拍照记录
9 `6 m" D2 g) l3 r. W+ O
! O3 k% Y+ R3 u! V* N- Q$ L1 t0 ~注意：所有操作都需轻柔，脂肪细胞比较容易破裂，脂滴外溢% z: A8 R; ~* x6 y
& [$ i$ G( O# s  }& |: {
附图：, Z* t1 p7 Y3 R. L! x* j- ^6 }

Learner

回复 zgzjhzxyj 的帖子0 p/ F. x) k8 o6 K$ m) O7 o

2 d; j9 l4 c* b6 q3 U# l, W4 [好像一般不用乙醇固定吧！

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

琛儿326

回复 glysh 的帖子
. _) E2 j3 I' L, K
. z. z9 N- a& M" f. @如果出现空泡是什么原因呢？

zgzjhzxyj

回复 Learner 的帖子5 }2 \% z: X1 y% P! O' U5 y! x, i- w4 H
. m8 ~$ ~4 I* p# O& U0 j
一般固定液都选用“10%中性甲醛固定”，尤其是大的组织标本。但在细胞实验中，95%酒精固定效果也很好，既然酒精的固定效果能达到我后续实验的要求，那当然选择酒精啦，毕竟甲醛气味重，对人体毒副作用也大！！！俺们比较怕死

havie

油红染色时，直接使用油红染色，不稀释，可以吗  
- r, `& Z& K- T4 ]8 I稀释后的油红，染色时，常会含有渣滓，有时染上了，颜色也较浅，不知是什么原因