关于油红O染色

gqs2872022

1.染色的工作液现配现用，不宜久置。
2 I( ~' ^$ n5 E- K7 K  T+ z2 z2.建议过滤工作液，能减少杂质使染色变得更好看。
1 L  `3 n" m* C" M3.染色前需加60%异丙醇5min。4 z. V& J' N7 W
4.染色时间15~20min。
9 U0 b: q' _# |9 c8 {( v6 U5.水洗，60%异丙醇分色，时间要恰当，不宜过久，过久估计全部都会掉。
( E1 V, [3 U  g; \, ~& A3 l6.苏木素复染可要可不要。

why121

最近也在做这方面的染色 根据成品说明书是用4%的多聚甲醛固定30min 然后PBS洗后 用3:2稀释的油红染色 但本实验室的显微镜不好 照的相感觉很差 想请教下你们用的是倒置显微镜多少倍还是用一般的光镜呢

zgzjhzxyj

油红O 0.5g 溶于100ml异丙醇中作为储备液,避光4度保存，用的时候油红O储液：蒸馏水=3：2的稀释。
/ x+ o5 d! b/ ]7 F4 }: M$ m步骤8 g3 u' S. K- A& I% m1 w5 L) h
1、固定：吸弃培养液后加入95%酒精固定30min或以上
. p3 ^3 h9 k& b# X2、漂洗:吸弃固定液，PBS漂洗1次5 r. _& ?) w1 U/ K  P6 a
3、染色：加油红O染液染色10-60min
: C& s- R3 W/ X8 c- |' @0 }4、漂洗：吸弃染液，PBS漂洗3次，尽量把背景洗干净，避免色素沉着% Y  d% L5 H5 x2 F. S, s
5、拍照记录. O$ K4 b4 a2 y3 W! V# k
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注意：所有操作都需轻柔，脂肪细胞比较容易破裂，脂滴外溢
5 X2 f! D# |; c8 @" V: e; x- C5 K$ W8 d% ~" S2 t# x
附图：
# v* w3 ]% W* c  {+ c. z1 z, f1 s

Learner

回复 zgzjhzxyj 的帖子5 I5 p1 r5 `5 G5 }, j2 S% C

. m, X: u+ f' ~* M好像一般不用乙醇固定吧！

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

琛儿326

回复 glysh 的帖子3 H5 ~/ R( X" m  e: S+ }3 l, I, x

" z' X& l1 s/ l' H4 B如果出现空泡是什么原因呢？

zgzjhzxyj

回复 Learner 的帖子
/ ?- {$ M; ]. |$ I# C8 ?/ s& U' d, r4 J3 [% W
一般固定液都选用“10%中性甲醛固定”，尤其是大的组织标本。但在细胞实验中，95%酒精固定效果也很好，既然酒精的固定效果能达到我后续实验的要求，那当然选择酒精啦，毕竟甲醛气味重，对人体毒副作用也大！！！俺们比较怕死

havie

油红染色时，直接使用油红染色，不稀释，可以吗  
2 K2 c: [5 S8 x7 [. }稀释后的油红，染色时，常会含有渣滓，有时染上了，颜色也较浅，不知是什么原因