关于油红O染色

gqs2872022

1.染色的工作液现配现用，不宜久置。
: Z' O# R% G) N2.建议过滤工作液，能减少杂质使染色变得更好看。( L1 B. T9 s2 v0 F. k3 C4 @
3.染色前需加60%异丙醇5min。/ a6 `) ]- M0 }1 d" N4 s# t6 r
4.染色时间15~20min。
: ?* o  J8 X( f0 a5.水洗，60%异丙醇分色，时间要恰当，不宜过久，过久估计全部都会掉。  T  s3 d. s# s9 V
6.苏木素复染可要可不要。

why121

最近也在做这方面的染色 根据成品说明书是用4%的多聚甲醛固定30min 然后PBS洗后 用3:2稀释的油红染色 但本实验室的显微镜不好 照的相感觉很差 想请教下你们用的是倒置显微镜多少倍还是用一般的光镜呢

zgzjhzxyj

油红O 0.5g 溶于100ml异丙醇中作为储备液,避光4度保存，用的时候油红O储液：蒸馏水=3：2的稀释。
5 F9 g  h% E* p4 l, V! P步骤
8 \7 K/ v# _" p% V1 S- i3 n: w/ U1、固定：吸弃培养液后加入95%酒精固定30min或以上* u" [, R' A; v! a0 O; s( R0 R
2、漂洗:吸弃固定液，PBS漂洗1次" Y( s3 [% {  X5 M! G8 b
3、染色：加油红O染液染色10-60min+ D! o, J+ }, ?4 k
4、漂洗：吸弃染液，PBS漂洗3次，尽量把背景洗干净，避免色素沉着# L7 U' Y! l$ c; I
5、拍照记录$ g3 C" q! \: I3 U: s* D

* N7 p8 z9 M+ x/ [注意：所有操作都需轻柔，脂肪细胞比较容易破裂，脂滴外溢- f3 R- c, W4 h. N! x
/ u3 U- M: E7 d. L: H' Z  e
附图：
! s+ |- Y; @. ~5 @' H' T1 H

Learner

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9 l2 L* O3 k: U& y6 K2 {; q7 ^3 v, Z, F
好像一般不用乙醇固定吧！

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

琛儿326

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( u1 F. ]0 B1 g/ T+ G
. I2 h' m1 G/ f- m如果出现空泡是什么原因呢？

zgzjhzxyj

回复 Learner 的帖子+ u& \2 y+ r# t4 Z8 M. b6 g
2 y/ R$ |0 z2 @
一般固定液都选用“10%中性甲醛固定”，尤其是大的组织标本。但在细胞实验中，95%酒精固定效果也很好，既然酒精的固定效果能达到我后续实验的要求，那当然选择酒精啦，毕竟甲醛气味重，对人体毒副作用也大！！！俺们比较怕死

havie

油红染色时，直接使用油红染色，不稀释，可以吗  
" d1 e+ r6 }% b: p稀释后的油红，染色时，常会含有渣滓，有时染上了，颜色也较浅，不知是什么原因