关于油红O染色

gqs2872022

1.染色的工作液现配现用，不宜久置。
+ _, X. P6 e! S& Y6 \2.建议过滤工作液，能减少杂质使染色变得更好看。* R9 e: `0 J. j7 t3 v
3.染色前需加60%异丙醇5min。
/ ]: _& S4 M- |' Y3 E8 R4.染色时间15~20min。
4 o+ ]* g* e$ M$ T" b  L  |5.水洗，60%异丙醇分色，时间要恰当，不宜过久，过久估计全部都会掉。
$ C/ {1 P2 x2 m1 y6.苏木素复染可要可不要。

why121

最近也在做这方面的染色 根据成品说明书是用4%的多聚甲醛固定30min 然后PBS洗后 用3:2稀释的油红染色 但本实验室的显微镜不好 照的相感觉很差 想请教下你们用的是倒置显微镜多少倍还是用一般的光镜呢

zgzjhzxyj

油红O 0.5g 溶于100ml异丙醇中作为储备液,避光4度保存，用的时候油红O储液：蒸馏水=3：2的稀释。
- u1 u8 y: X% M步骤
0 i8 t5 ~/ {, a1 v6 j9 Y1、固定：吸弃培养液后加入95%酒精固定30min或以上6 X" x; k+ C5 j) k+ t
2、漂洗:吸弃固定液，PBS漂洗1次
) R; v+ y* Q5 e7 _3、染色：加油红O染液染色10-60min
. Q8 L1 r& x% K. S$ g- E+ A- S4、漂洗：吸弃染液，PBS漂洗3次，尽量把背景洗干净，避免色素沉着; E( w  ?8 ~$ E
5、拍照记录
  B, p; \7 _) z" H3 S2 O
0 v) u  ]$ `8 i. d9 d. T注意：所有操作都需轻柔，脂肪细胞比较容易破裂，脂滴外溢
  s' |/ }4 X1 f2 F" C! o4 |; j. e: _+ Q/ @: r, p0 i- G
附图：
! J  m$ S' R! n2 s5 \. ~

Learner

回复 zgzjhzxyj 的帖子
  p! ~7 ?) K& V  y" @6 K% Q. l
3 Y3 A! `% Z6 X" S* N( Z7 q好像一般不用乙醇固定吧！

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

琛儿326

回复 glysh 的帖子3 ?6 b' S3 ^! q, o! c* ~% [2 G  k

9 |; e2 g3 W% M  s- u( J* S! V" |如果出现空泡是什么原因呢？

zgzjhzxyj

回复 Learner 的帖子
6 E2 P2 F- ^- ~$ i7 L
, f4 \! s- W2 O" h2 W' M一般固定液都选用“10%中性甲醛固定”，尤其是大的组织标本。但在细胞实验中，95%酒精固定效果也很好，既然酒精的固定效果能达到我后续实验的要求，那当然选择酒精啦，毕竟甲醛气味重，对人体毒副作用也大！！！俺们比较怕死

havie

油红染色时，直接使用油红染色，不稀释，可以吗  
$ ~- L: T- z& T稀释后的油红，染色时，常会含有渣滓，有时染上了，颜色也较浅，不知是什么原因