求小鼠骨髓间充质干细胞的培养经验

xiaozhu86

取的三周龄的小鼠四肢骨髓及骨渣，培养条件没有问题，营养充足，没有污染，但是原代细胞始终生长缓慢，贴壁细胞不足，形态伸展不佳，急求各位高手经验~~非常感谢

death0270

如果培养条件确定没有问题的话就换液去除杂质吧，太多组织碎块和血细胞是会影响MSC贴壁的。

xiaozhu86

培养三天后第一次换液，之后两天换一次，贴壁细胞数量始终不足，生长缓慢~十分不解

文武庙

一般小鼠较人的生长慢一些，不知道楼主是否加入生长因子了吗？可以加因子促进一下。

xiaozhu86

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没有加特别的因子促进生长，就是普通的含10%的胎牛血清的a-MEM培养液培养的，感觉用的三周龄的细胞活性应该比较好才对啊，但是长得很不理想~想问下，如果加因子的话，这方面您有什么经验么~望不吝赐教，非常感谢！

onestar

我看你首先应该把骨渣的问题解决~你可以购买 strainer，5 _2 I5 f/ r, V8 G9 |
把抽出来的通过strainer的话， 就没有骨渣啦~# l* t; m& l4 Y* V
这样细胞贴壁应该很好~# W8 a* u! ]: ^4 m- t& }

xiaozhu86

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9 B$ u; v) G  b% i4 O3 V% H$ K; T9 w4 |: U/ L$ [
关于骨渣分析有可能骨质中的一些成分或分泌的东西能够促进细胞的生长，特意留的。如果不要的话直接只提取骨髓~~试试看下。谢谢

onestar

因为我不是对骨渣有什么了解~目前我培养的就是骨髓干细胞，把骨渣去掉以后，剩下的长的挺好的。有时间带骨渣的我也试试看看~
, V. f4 G9 V9 z呵呵. \' J& W0 T3 ~7 @  E

寒小溪

我养的也是小鼠间充质干细胞，直接用5ml注射器抽取培养基把骨髓冲出来  刚开始会比较杂  但换过几次液之后就长得挺好了

xiaozhu86

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2 |8 P" [6 c3 m; C5 Z1 L嗯嗯，大家互相交流下经验，看哪样生长的最好，O(∩_∩)O~