这里基本没人有拍细胞的电镜照片？

jiojoo

刚搜索了一下，基本没有人做细胞电镜
' _2 i- k: [, t/ N6 }2 y难道大家都不需要看细胞的形态？
6 W! O- Q3 l) A) n; q我想知道细胞样品制样时需要注意的问题
9 n. C3 k8 e6 n3 G我一般见到的是用固定剂固定，然后酒精脱水，自然风干，但是效果很一般，做不出漂亮的图片来6 C8 I2 K2 A5 [
细胞固定后真空冷冻干燥不知效果会不会好一点？另外冷冻时细胞会不会被冰晶损伤？
+ q4 r. Y5 E/ w9 C/ L! b! X有做过或知道的来分享一下经验吧

gqs2872022

不知道楼主想做哪方面的研究？
6 |) v8 g( n. F+ z: ~) g一般来说，看细胞形态的话做常规病理切片HE染色就行，
% a% H* K( ]  {( E# F/ I' Q) n这里有两种状况，如果是一般的培养细胞，贴壁细胞的话! v+ K6 h4 U& N( u( P" T
用盖玻片培养后染HE或者做组化、杂交之类的，如果是
6 o) K7 U2 |5 l( `2 T悬浮细胞的话可以用细胞甩片机甩到载玻片上。
  W2 n8 ?- G( M3 v6 W! U然后再进行HE或者做组化、杂交之类的实验。, c+ l* @. A2 g0 j0 R
另一种是干细胞方面培养的细胞团块，可以做冰冻切8 K6 g* Y$ a# T" P
片后染色或者做石蜡切片也行。至于说具体怎么做，. U& t& u2 \7 Z+ q0 E: t
这是技术人员的事，我想作为我们知道怎么去利用这些
+ k' I3 \/ v$ u; |方法去完成或实现自己实验就行了。
& a) d6 i$ e. o
0 b  _7 Y4 r* _6 f9 i. ^如果是想研究细胞内细胞器的发育或损伤情况可能才需用到电镜。1 e( `8 \* ^0 G+ [) ]" @- F7 l
但楼主说的流程又不是电镜的流程，所以可能楼主是混淆了概念。4 p* O1 p3 b  {& k) n' W
普通显微镜和电镜是两种不同的东西。
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不知道我的经验对楼主有无帮助。
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jiojoo

回复 gqs2872022 的帖子* S+ W9 P1 `6 g$ ?4 V) s' y

0 G* K( f: j+ V2 f5 [7 d- N我没说清楚，我说的是扫描电镜的制样
: F& ~: ?+ m9 A7 j; _因为我不是单纯的细胞实验，是细胞与材料的复合体，需要看细胞的形态及分布

gqs2872022

回复 jiojoo 的帖子2 p1 N, i& e8 H

- C6 d# M4 F0 E+ m. a4 S: j% b呵呵，你们的电镜制样也需要自己去弄吗？# [* s  d1 {/ T% d4 I
我认为那是电镜室工作人员的事，
2 i5 }& N" F  I1 ~你只需要把取材好，选择好需要观察的面，
* a* [" N+ T: B* Z2 Y5 g  k) `用2.5%戊二醛固定好就行。
5 J  [! ]1 r' Q; c7 \. W, l6 {, p5 X! o; }
一般地：扫描电镜：取材，漂洗，2.5%戊二醛固定，
; z# m4 f+ J4 N8 u漂洗，1%锇酸后固定2h，漂洗，8 i6 r- Q$ }4 ]- |
梯度丙酮（50%、70%、80%、95%、100%）各15min脱水，
9 G& C* {+ @9 O$ Y0 H" y乙酸异戊酯置换或叔丁醇30~60min，临界点干燥（或冷冻干燥），2 q4 p' g1 [! k/ R9 l+ B: h$ l/ G5 i2 V
镀膜，观察。
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扫描电镜图像有4个方面的缺陷：荷电效应，损伤，污染，边缘效应。
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. {. {% x1 E  Z# x% T建议楼主把技术活还给技术人员，像这种分析植入材料、
( t$ C, D+ e9 M2 x( T) r植入支架等他们做得多，自然会处理好你的样品。你等着要结果就行。

jiojoo

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1 I0 v! @( X; c2 S谢谢, ?4 F; H: a% F' J7 q+ N
我在这里基本所有的活儿都是自己做，连扫描电镜也是自己操作

embryonic12

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2 x- R5 g0 F2 w. [, t# q
建议你查一些材料学方面的期刊，比在生物方面找命中率大。polymer， macromoleclule rapid communication，bio polymer， macromolecule 等杂志中经常由于你雷似的工作。