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go

做的慢病毒的荧光照相48h [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-6-23 03:01 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
大家指教一下
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沙发
发表于 2011-6-23 03:23 |只看该作者
怎么细胞这么圆呢?是不是已经许多都飘起来了?这样的话收毒的时候应该离心一下去掉细胞碎片。
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藤椅
发表于 2011-6-23 06:37 |只看该作者
回复 pla269 的帖子8 z6 n  A  Z' T" H$ b* h* s
# \# ^, W8 I. B2 H
看起来效率不是很高,建议照一张明场下的视野,然后跟荧光下的视野Merge一下,这样更容易直观判断。当然,不嫌麻烦的话,最可靠的还是测病毒滴度。
, I7 W8 H) z) D; P- i+ n- w# K至于楼上说的看到很多细胞变圆了,这个是很正常的,293T从开始产生病毒开始就不再生长了,所以包毒之前要在293T长到合适的汇合率。病毒介导的细胞融合可能也是细胞变圆的原因。
! a* V' T1 N! D& u3 ^% Y293T贴壁不好,尤其包毒之后,所以换液小心是必须的~~
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板凳
发表于 2011-6-23 08:27 |只看该作者
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回复 pla269 的帖子# w! t6 F; w6 |9 M- v- b
. J# E/ t$ c6 R
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报纸
发表于 2011-6-23 10:38 |只看该作者
用fermentas的转染试剂可以得到很好的转染效果
( }5 q/ |7 P! Y转染效率在90%以上,操作简便,毒性小,价格也比脂质体便宜。8 H) Y2 F' Q" M
最关键是假货少,不像脂质体,3支有2支是假的。
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