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楼主: dilal
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为啥iPS培养液体黄的这么快?   [复制链接]

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发表于 2011-7-11 12:27 |只看该作者
可能是支原体污染……
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发表于 2011-7-11 12:28 |只看该作者
基于你描述的情况:. L; ~$ J$ v; ~5 a% c/ \6 T) m2 e. g
建议3点:5 f0 v* ~' c* v: @; N0 I( K% f! n5 m
1、        检查一下培养液本身PH值:
/ F& L7 m3 ?- f5 W! I+ p8 T一般情况下,我们所用的培养液pH介于7.2~7.4之间;加入细胞后随着细胞生长时间的延长,细胞代谢产生的酸性产物会使培养液pH值下降,引起颜色变浅变黄。但是,我记得Knockout SR本身就是黄色的,所以你需要确认一下培养液添加前后颜色变化的幅度,分别都测一下PH值。4 C7 ]" C: m& f. @. ]) Q" o$ ^

: |% G$ i# P- E+ c% o1 R2、        测一下培养箱CO2浓度;7 E; G. B* s: b
3、        作个对照试验,检查一下你的饲养层细胞。' a2 y7 _3 X/ i9 T2 T3 `# H3 r
希望对你有所帮助.
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发表于 2011-7-11 23:47 |只看该作者
应该不是什么问题,Knockout DMEMF12颜色本来就有点偏黄,加上血清也是黄色的,所以你的培养液陪完后整体就是有些发黄的,所以只要细胞没什么问题就说明你的培养液正常,观点同9楼,该培养液陪完平衡一会就是黄的,放入培养箱后黄色更显。别担心哈!
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发表于 2011-7-12 10:28 |只看该作者
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我用D/F12加20%KSR配完了就很黄 我做过测试都没有问题 应该是是D/F12的颜色的问题
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发表于 2011-7-13 09:44 |只看该作者
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7 I9 j, g% y: Q. c% k3 l! K, M0 p4 E& z4 ?. r' j0 C/ ^8 H
谢谢,还担心了好一段时间,怕液体太黄了,影响细胞状态

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发表于 2011-7-14 19:44 |只看该作者
我也在养小鼠的IPS细胞, 用的是进口FBS血清,浓度15%,培养液也是容易变黄,但是没有你说的黄那么快,一般是一天就变黄了,IPS长的很快,一般两天就必须传代了。另外,你用的是KSR,配出来的培养液本身也偏黄,建议多加点培养液。
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发表于 2011-7-26 00:21 |只看该作者
是不是因为feeder cells 也在消耗培养液,也在产生酸性的代谢产物,所以会黄的很快,再说,我配好的液体本来就是偏黄的呀
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发表于 2011-7-26 08:58 |只看该作者
最近在一个干细胞培养手册上看到了相关解释,KSR配制的培养基本身就有些偏黄,iPS培养后的确很容易变黄,属于正常现象。最近将iPS细胞和ESC细胞对比了一下,发现iPS细胞的确长得很快,一般一天就变黄了。
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发表于 2011-7-26 08:59 |只看该作者
最近在一个干细胞培养手册上看到了相关解释,KSR配制的培养基本身就有些偏黄,iPS培养后的确很容易变黄,属于正常现象。最近将iPS细胞和ESC细胞对比了一下,发现iPS细胞的确长得很快,一般一天就变黄了。

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发表于 2011-7-26 09:56 |只看该作者
培养ES cell加有feeder cells ,feedrer cell 本身也会消耗培养液,产生酸性的代谢产物,使其颜色变黄;* z5 W6 |8 w' j( f
再说,我配好的human ES 培养液本身的颜色就是偏黄的啊
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