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楼主: dilal
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为啥iPS培养液体黄的这么快?   [复制链接]

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发表于 2011-7-26 22:39 |只看该作者
在400倍镜下如果如果看不到细菌,应该就没有污染。如果使用KSR培养iPS,再加上培养液中的NEAA,一天之后变黄,很正常。iPS耗能很快,不能超过一天换液,密度不要太大。小鼠的iPS建系时使用KSR比较好,在后期的培养中使用胎牛血清比较好,嵌合体效率高。有文献发表,可查阅。
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发表于 2011-8-1 23:51 |只看该作者
饲养层细胞也在消耗代谢产生出酸性代谢产物,会使培养液颜色变黄,仔细观察一下是不是饲养层细胞没有有效的抑制其分裂还在生长?
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发表于 2011-8-3 12:07 |只看该作者
1、feeder的密度,接种的细胞是多少?两者均不宜过密/ L9 [1 K4 {: t& k5 a
2、KSR/DF12还是FBE/DMEM?前者本身就会发黄
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发表于 2011-8-4 09:39 |只看该作者
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已经证实了是KSR培养基自身的特性,我抽了一点培养基到离心管中,放入孵箱孵育,第二天去看液体就变成黄色的了。不过iPS对于培养基的消耗的确比较大,不知道是什么原因。
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发表于 2011-9-1 16:09 |只看该作者
估计是支原体污染的,我以前遇到过,支原体污染你看不到培养基浑浊的,会从细胞的状态看出来的,你做一下PCR吧
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发表于 2011-9-2 16:33 |只看该作者
大家好我也养小鼠ips 每次上饲养层之后就污染 不知道什么原因了 求教啊
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发表于 2011-9-2 17:06 |只看该作者
回复 遗云射月 的帖子  [1 F" M- w" X* z
% C6 O( l6 g1 i- @4 V& i
建议查饲养层,最常见的是动物源性的支原体污染。
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发表于 2011-11-11 23:17 |只看该作者
回复 xq1205 的帖子
, S: V: H6 Y' ?, p' _8 ?. k7 B7 _+ d; B
求您所说的这篇文献,可以吗,嘿嘿,可以告诉名字即可。多谢啦。

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发表于 2011-11-12 09:23 |只看该作者
dilal 发表于 2011-7-11 12:20
' c( w7 o6 J, \1 W9 Y$ \6 v% q回复 cicadacjk 的帖子
8 c( D4 {' x7 e3 z1 Q& u, A6 Z+ r$ `. I1 U. S8 f, C2 j
是的,我们配制的浓度是15%,按照广州生物医药与健康研究所提供的配方配制的,细胞 ...
7 ?; {  ?. O% i1 m* ^1 ]
有意思,值得关注

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发表于 2011-11-12 09:24 |只看该作者
dilal 发表于 2011-7-11 12:20 4 E2 P: K' f6 C/ H
回复 cicadacjk 的帖子
( S8 d3 A1 F/ f' d
0 F. V: C9 k+ Y是的,我们配制的浓度是15%,按照广州生物医药与健康研究所提供的配方配制的,细胞 ...

, N, ]0 h. L* e" l# I! X! J值得关注
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