为啥iPS培养液体黄的这么快？

xq1205

在400倍镜下如果如果看不到细菌，应该就没有污染。如果使用KSR培养iPS，再加上培养液中的NEAA，一天之后变黄，很正常。iPS耗能很快，不能超过一天换液，密度不要太大。小鼠的iPS建系时使用KSR比较好，在后期的培养中使用胎牛血清比较好，嵌合体效率高。有文献发表，可查阅。

wangyimei

饲养层细胞也在消耗代谢产生出酸性代谢产物，会使培养液颜色变黄，仔细观察一下是不是饲养层细胞没有有效的抑制其分裂还在生长？

song1978

1、feeder的密度，接种的细胞是多少？两者均不宜过密
3 P2 p" y* h1 d7 b; b) B2、KSR/DF12还是FBE/DMEM？前者本身就会发黄

dilal

已经证实了是KSR培养基自身的特性，我抽了一点培养基到离心管中，放入孵箱孵育，第二天去看液体就变成黄色的了。不过iPS对于培养基的消耗的确比较大，不知道是什么原因。

iyaofying888

估计是支原体污染的，我以前遇到过，支原体污染你看不到培养基浑浊的，会从细胞的状态看出来的，你做一下PCR吧

遗云射月

大家好我也养小鼠ips 每次上饲养层之后就污染 不知道什么原因了 求教啊

dilal

回复 遗云射月 的帖子( v2 T( e) I; }+ {2 y) D
. K/ Z! D3 N' Y+ R1 d+ y- \* f; Q
建议查饲养层，最常见的是动物源性的支原体污染。

sarah19860420

回复 xq1205 的帖子
8 H4 E( A6 F) Z  l% m
9 a- J' }" O9 i# K" c  x! D求您所说的这篇文献，可以吗，嘿嘿，可以告诉名字即可。多谢啦。

yangpan521

dilal 发表于 2011-7-11 12:20
# c: A) D7 @& |9 C% ^1 K回复 cicadacjk 的帖子; c9 b7 s5 J( G3 T
$ a# S( ^9 ?5 N1 Q
是的，我们配制的浓度是15%，按照广州生物医药与健康研究所提供的配方配制的，细胞 ...

4 m$ j& C9 z/ Z% u
有意思，值得关注

yangpan521

dilal 发表于 2011-7-11 12:20
. U. W5 R% X/ Y回复 cicadacjk 的帖子# X& O8 _% O* W6 d% z. I7 ?

; g) s( ]1 r" s! ~: x6 a- f9 E8 ]4 K是的，我们配制的浓度是15%，按照广州生物医药与健康研究所提供的配方配制的，细胞 ...

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值得关注