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楼主: dilal
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为啥iPS培养液体黄的这么快?   [复制链接]

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发表于 2011-7-26 22:39 |只看该作者
在400倍镜下如果如果看不到细菌,应该就没有污染。如果使用KSR培养iPS,再加上培养液中的NEAA,一天之后变黄,很正常。iPS耗能很快,不能超过一天换液,密度不要太大。小鼠的iPS建系时使用KSR比较好,在后期的培养中使用胎牛血清比较好,嵌合体效率高。有文献发表,可查阅。
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发表于 2011-8-1 23:51 |只看该作者
饲养层细胞也在消耗代谢产生出酸性代谢产物,会使培养液颜色变黄,仔细观察一下是不是饲养层细胞没有有效的抑制其分裂还在生长?
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发表于 2011-8-3 12:07 |只看该作者
1、feeder的密度,接种的细胞是多少?两者均不宜过密. y* |* |& G; J( u
2、KSR/DF12还是FBE/DMEM?前者本身就会发黄
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发表于 2011-8-4 09:39 |只看该作者
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已经证实了是KSR培养基自身的特性,我抽了一点培养基到离心管中,放入孵箱孵育,第二天去看液体就变成黄色的了。不过iPS对于培养基的消耗的确比较大,不知道是什么原因。
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发表于 2011-9-1 16:09 |只看该作者
估计是支原体污染的,我以前遇到过,支原体污染你看不到培养基浑浊的,会从细胞的状态看出来的,你做一下PCR吧
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发表于 2011-9-2 16:33 |只看该作者
大家好我也养小鼠ips 每次上饲养层之后就污染 不知道什么原因了 求教啊
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发表于 2011-9-2 17:06 |只看该作者
回复 遗云射月 的帖子
7 f$ G6 M# n2 _& s8 E0 ^2 H- P! x8 q9 T; ^# x
建议查饲养层,最常见的是动物源性的支原体污染。
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发表于 2011-11-11 23:17 |只看该作者
回复 xq1205 的帖子
8 F: T6 j( M2 y, K$ c. x2 [% O! d; |: i( u0 Z4 |
求您所说的这篇文献,可以吗,嘿嘿,可以告诉名字即可。多谢啦。

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发表于 2011-11-12 09:23 |只看该作者
dilal 发表于 2011-7-11 12:20 & [$ X( v$ q7 G- ^3 t; \
回复 cicadacjk 的帖子
3 x4 `5 o, x: e: C; X
9 F8 Z1 l4 [5 h9 N+ C是的,我们配制的浓度是15%,按照广州生物医药与健康研究所提供的配方配制的,细胞 ...
: C+ I" }" m7 C7 B4 c
有意思,值得关注

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发表于 2011-11-12 09:24 |只看该作者
dilal 发表于 2011-7-11 12:20 - R: ^% l7 k. J2 v$ h% e
回复 cicadacjk 的帖子
( F& e: A2 B: x" A
; p3 h1 c6 S& X% m9 }  \' D是的,我们配制的浓度是15%,按照广州生物医药与健康研究所提供的配方配制的,细胞 ...

# D! |5 _- A5 S  ]4 ^值得关注
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