为啥iPS培养液体黄的这么快？

xq1205

在400倍镜下如果如果看不到细菌，应该就没有污染。如果使用KSR培养iPS，再加上培养液中的NEAA，一天之后变黄，很正常。iPS耗能很快，不能超过一天换液，密度不要太大。小鼠的iPS建系时使用KSR比较好，在后期的培养中使用胎牛血清比较好，嵌合体效率高。有文献发表，可查阅。

wangyimei

饲养层细胞也在消耗代谢产生出酸性代谢产物，会使培养液颜色变黄，仔细观察一下是不是饲养层细胞没有有效的抑制其分裂还在生长？

song1978

1、feeder的密度，接种的细胞是多少？两者均不宜过密% m  @( s* y% W1 y6 o5 |
2、KSR/DF12还是FBE/DMEM？前者本身就会发黄

dilal

已经证实了是KSR培养基自身的特性，我抽了一点培养基到离心管中，放入孵箱孵育，第二天去看液体就变成黄色的了。不过iPS对于培养基的消耗的确比较大，不知道是什么原因。

iyaofying888

估计是支原体污染的，我以前遇到过，支原体污染你看不到培养基浑浊的，会从细胞的状态看出来的，你做一下PCR吧

遗云射月

大家好我也养小鼠ips 每次上饲养层之后就污染 不知道什么原因了 求教啊

dilal

回复 遗云射月 的帖子0 b/ |, b& z( M- Y- y

, q0 g, y& O7 K2 q# a建议查饲养层，最常见的是动物源性的支原体污染。

sarah19860420

回复 xq1205 的帖子
9 O: n; Q$ l# |# a' K( N4 c; Z0 _# y8 A% w& |' K0 e
求您所说的这篇文献，可以吗，嘿嘿，可以告诉名字即可。多谢啦。

yangpan521

dilal 发表于 2011-7-11 12:20 - h* o$ ~; j- ]$ O' J
回复 cicadacjk 的帖子
2 M4 v7 t9 q6 T6 _  _" z9 g. M9 k
是的，我们配制的浓度是15%，按照广州生物医药与健康研究所提供的配方配制的，细胞 ...

; \* y8 Q1 e- d0 A
有意思，值得关注

yangpan521

dilal 发表于 2011-7-11 12:20
' `* J. D3 r" s& q/ k% c/ i& I0 p回复 cicadacjk 的帖子
( R  @  i7 [1 R/ H+ p7 ^- L3 `2 \! _7 e" K
是的，我们配制的浓度是15%，按照广州生物医药与健康研究所提供的配方配制的，细胞 ...

8 B' Q1 e9 U1 S, \& N
值得关注