ips全军覆没，我该怎么办？

oucflora

回复 rongrong 的帖子* B: Z& R; C, D$ u# i! Q+ _
: P1 x! r* A. }  j/ O; y
20%,曾经一个师兄用过更高的浓度，大概30%，细胞情况也挺好。

oucflora

回复 rongrong 的帖子
1 f" a' \6 i: Y) g0 m0 O
. b' e' G, G: P* J. }在-80度放置两天对细胞成活率影响不大，倒是液氮量特别少，会导致细胞死亡较多。
# V  r# O0 s! O6 O" I
% k% n) @- P) r3 a' |* \补充内容 (2011-9-5 20:27):
) V8 m  d3 s( }5 W8 j* F3 f2 l& x不过如果你们的液氮罐是保温较好的进口的话，影响倒是不大& x7 U! E1 d8 d* H7 |. u

; V3 }+ f" F8 S补充内容 (2011-9-5 20:28):/ n7 g" N6 h8 [" b5 W  g
“进口”的意思是“非国产”

evial

FBS：DMSO=9:1你的浓度低了

rongrong

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% H, v' D4 [" H( `
% e6 T( G/ O6 o9 x0 E3 w3 ^9 A! r恩，好的，谢谢鼓励啊，继续前行再接再厉

jiefengbing

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* u' f8 i" s2 X" ]$ P* {/ i( U( Z+ f& J0 t/ `# {* G
wicell 复苏ES不需要离心？正好我手头上有一份，200g离心5min,然后gently re-suspend cell pellet.不知道您的步骤是哪个版本，可否让我看看？

hnczlw48005

复苏温度应该在37°，冻存干细胞时的血清很重要，最好用进口血清，浓度越高越好，可以用90%FBS+10%DMSO作为冻存液。

yangel

rongrong 发表于 2011-9-4 11:45
3 c- p" G3 }( ?5 |( \8 w大家好，我是一个IPS的培养新手，我4月份冻存了一支ips，冻存液干细胞的全培养基+FBS+DMSO=6:3:1，复苏时铺 ...

  x3 [6 Y! f4 W' ~* F% C7 j0 n% z做的没错！复苏成这个现象也正常，再养几天看看有没有小的ips clusters长出来。要提高复苏效果的话用Y-27632处理24h。