ips全军覆没，我该怎么办？

oucflora

回复 rongrong 的帖子
# b; z, D: U$ n! }/ B8 N
' g  \4 n+ c$ z- a( N4 j: U20%,曾经一个师兄用过更高的浓度，大概30%，细胞情况也挺好。

oucflora

回复 rongrong 的帖子; K8 D/ |* k8 t3 a

9 I* [5 D( J$ O5 V- `4 [+ t. m% o在-80度放置两天对细胞成活率影响不大，倒是液氮量特别少，会导致细胞死亡较多。
" ?8 f( Z9 ]. o( q, M. y' u# x2 A' r# C! N
补充内容 (2011-9-5 20:27):0 Y, w2 q: O. {2 k
不过如果你们的液氮罐是保温较好的进口的话，影响倒是不大( z+ J& N" _0 B$ v. I- ]4 H( p: a# `

) @- ]! d/ z/ i# h补充内容 (2011-9-5 20:28):5 s) S/ g" w& o9 T! y
“进口”的意思是“非国产”

evial

FBS：DMSO=9:1你的浓度低了

rongrong

回复 张也行 的帖子
, _. o- Q4 T& [4 |, C9 I
; @. T4 }0 m# Y& u" V" N恩，好的，谢谢鼓励啊，继续前行再接再厉

jiefengbing

回复 cicadacjk 的帖子9 D! y  q. _" J& m7 \2 ?6 @8 A

# C$ _. p) b- p/ Mwicell 复苏ES不需要离心？正好我手头上有一份，200g离心5min,然后gently re-suspend cell pellet.不知道您的步骤是哪个版本，可否让我看看？

hnczlw48005

复苏温度应该在37°，冻存干细胞时的血清很重要，最好用进口血清，浓度越高越好，可以用90%FBS+10%DMSO作为冻存液。

yangel

rongrong 发表于 2011-9-4 11:45 : t+ d5 f( p% `/ f. K( f
大家好，我是一个IPS的培养新手，我4月份冻存了一支ips，冻存液干细胞的全培养基+FBS+DMSO=6:3:1，复苏时铺 ...

9 w- b6 o0 Q2 A* ~' H% h做的没错！复苏成这个现象也正常，再养几天看看有没有小的ips clusters长出来。要提高复苏效果的话用Y-27632处理24h。