MSC的无血清培养效果如何

透明之蓝

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本人使用过无血清培养体系，Gibco的CTS（AIM-V），还是有血清的对细胞生长更有利，细胞状态更好！因为有血清体系更加接近细胞的原始生长环境！但是，有理论显示：培养基的成分和血清中的其他成分会对干细胞的生长和分化有影响！这就是为什么大家建议用无血清代替有血清的原因，而且，提倡用a-MEM代替DMEM也是这个原因，前者成分较少，不会引起细胞分化等等。希望大家能够找到一些相关的文献分析一下!

barley

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/ s5 A5 O. s* }
( x; j4 N* ?/ y1 _; q9 \# Raim-V是免疫细胞培养基还是stempro？

透明之蓝

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" P" Z  W/ Y: u5 t4 n- c6 a
. ~- T! X- |8 Y1 y& ?& Y( J是免疫的！我这里免疫和干细胞都做，所以写在一起了，现在免疫主要用1640+血清了，干细胞主要是DMEM+血清~

hawkyiger

无血清体系和有血清的体系培养MSCs的效果差别是有的，我同时用过两种对比过。无血清培养基培养的细胞偏细偏长，细胞之间有空隙，但增殖速率并不慢（用的是北京一家实验室自己配的SUS），且流式等各项指标和有血清的也没什么区别，只是在细胞长到80%左右就大面积脱落；有血清的细胞形态较好，且能长到100%还能维持较好形态甚至多层生长。因此在做无血清培养时，传代时密度要稀，另外要勤加观察。

lele

我正准备买gibco无血清培养基呢，他不好用的话，那用什么无血清的培养基啊？用过的同仁给提个建议

sijicc

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% u1 y& k9 v" J7 ]/ T4 }) K! a. |, \% T6 u7 G4 S; Q
。。。你的培养技术有问题

zxmrose

我们家的有血清和无血清都长的挺好的，有血清长出来的细胞偏大和扁平，无血清的则较幼嫩。但是无血清培养出来的细胞传代到20代的时候发生过疯长，2天就传代了，细胞有可能变异了。还有就是gibco的无血清培养基是要铺基质才能长出哈。

zhang0194

贴壁没有血清的好，但是也挺牢靠的，一般72H 就能传代一次！量就是75的瓶子10ML！

forcat

tingwuyu 发表于 2011-10-29 09:47
" }8 I; `2 T# f用过stemcell和gibco的无血清，坑爹啊，都不长

% {& L6 e( i0 g% M& L
我比较过Gibco的stempro、Stemcell的Mesencult-XF和Lonza的CD无血清培养基。三种培养基培养效果都FBS+MEM-A效果好，不仅细胞形态更小更均一，而且细胞生长速度也非常块。细胞即使达到200000/cm2的密度从光镜下看都还有一些小的空隙。8 d6 {2 \* w6 x+ v4 S7 }# [
至于你说的长不好或者不长的情况，我相信你可能没有根据说明书。因为Gibco的stempro、Stemcell的Mesencult-XF这两种需要各自公司的干细胞细胞基质，加上500ml完全培养基，基本要7000元左右的价格，如果不加基质，细胞是长不出来的（这个非常重要），所以即使你铺一点gelatin都可以长得好，不过没有公司的基质优化的好而已。
# r/ `$ ^: @% e; u1 S  O而Lonza的CD无血清培养基为化学限定培养基，按照抗体无血清培养基概念应该是最高级的一种无血清培养基，Lonza的这款培养基不需要预铺细胞基质，细胞一样长得很好。不过个人认为没有铺基质的ibco的stempro、Stemcell的Mesencult-XF培养的MSC形态好。还有个问题，就是CD培养基基（或者无血清培养基）不铺基质，细胞高密度容易大片脱落（细胞贴壁不紧）。
0 E( B" t! d& r# x4 R9 V所以大家如果不要求很高密度的细胞培养，可以使用lonza CD培养基，市场价格为3000元/500ml。当然，如果对血清没有要求，使用Stemcell的Mesencult-ACF血清培养基效果也非常好。如果实在没有钱（呵呵），就用FBS培养基，不过记得加5-10ng/ml的bFGF，细胞同样会长得很好。
% @+ n3 f$ M+ [6 V& z% j最后，如果做分化，个人认为不要用上述无血清培养基，因为上述无血清培养基都是为MSC培养优化的，根据说明书尤其优化的对血细胞的污染。同时由于无血清培养基都是保持MSC干细胞状态所涉及的，所以添加文献报道的因子可能会被抵消很到的分化效果。所以慎重！（我没有尝试过，不过有文献报道某些因子甚至脐血浆对分化有抑制作用）

barley

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分析的太好了，学习~~~牛人啊