球长出来了，几个小问题请教，如何分离球？

doundo

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doundo

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; i3 v/ s8 E; I+ l0 Z8 G感谢您的解答。2 ~" o2 ~1 d& E! Z
我有三株肿瘤系细胞株，加无血清培养，细胞增殖很快。
4 |$ W( ^5 o% }( O- c' G8 D此外，从我样的原代来看，除了细胞球之外，还可以看到许多悬浮的小细胞，这些应该都是肿瘤细胞而非单个的肿瘤干细胞。3 d9 b$ N5 ?4 u# o& n+ j" z" R# r; g
: S* g0 G: w+ E! F
那么肿瘤细胞到底能否在血清培基中培养？
2 z# L1 N; n( U9 [1 Y7 E2 z+ c0 d& x( g- F9 O. M
干细胞之所以能生存，应该是生长因子以及B27的成分起作用。这些成分也能非干细胞性质的肿瘤细胞提供生长条件吗？

zz091115

回复 doundo 的帖子2 W0 g3 a$ C& p$ v5 c9 t1 s% r5 e$ @
5 c. M" r8 C$ _* t, n1 L7 I  U
悬浮培养除了你提到的细胞其它会死的原因是因为正常细胞需要贴壁获得survive的信号 一旦不能贴壁就会激活apoptosis信号 就会死掉 不是因为缺乏血清 实际上你加的B27就是血清替代物 不直接用血清我想是想要避免血清内的一些RNA对细胞信号的干扰吧（个人猜测） 我想知道你的EGF和FGF和B27加的多大浓度 基础media是不是DMEM/F12 此外还添加了别的什么没有 我准备做下 但是发现没有现成的培养基 只能自己配置了

doundo

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; c0 t8 l/ g9 n) P% y0 E
9 F. [4 V  |/ M: w+ R1 z如果非干细胞会在悬浮状态下凋亡，那么传了几代的干细胞，除了球之外的悬浮的单个细胞都是干细胞？
, b: Z& c& F7 X% ?# I1 J$ T3 q' m( L  c4 B2 e
我自己买的细胞株 三株都是悬浮细胞。而我养的原代也是悬浮细胞。
( h5 u2 r4 L+ ]4 w/ ?) V; f$ ?7 d0 q. F2 [+ n/ C4 R4 Y

zz091115

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" v% o1 j$ P+ O8 o$ a  J4 x) @1 ~: W# h) ~
肿瘤细胞可以悬浮培养的 很多血液细胞也能悬浮培养