急！急！急！急！CIK细胞实验中出现的问题？？？？

DannyXia

可能是单核细胞。CIK是悬浮的。

lyj-0017

回复 meister 的帖子6 ]# _: }7 x0 n" N9 j& K- k3 s7 H' {
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IL-2降解？这怎么检查IL-2是否降解呢？我们把IL-2加入培养基后一般三四天就会全部加完，平时放在4度冰箱保存，IL-2在这段时间难道会降解吗？
2 F& \# @0 |3 o另外一个，会不会是细胞在增殖较多，而在此之前并没有添加够足量的培养基而导致细胞死掉呢？（也就是你说的细胞密度过高）

meister

回复 lyj-0017 的帖子, |2 e/ U, ^5 x$ T

& j% T  Y$ o3 h' Y% j( ^因子降解不容易检测。 所以因子要分装， 避免反复冻融。 会不会是细胞密度太高，营养不够就不好说了， 得自己观察。

woosheng

回复 DannyXia 的帖子9 @" ~3 r9 q0 e% V: z. y! c
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说的有道理。仔细观察贴壁细胞，会发现有两种细胞。一种胞体纤细突起多，另一种胞体大突起少。这两种应该都来自单核细胞，会防碍淋巴细胞增殖。

lyj-0017

回复 meister 的帖子2 H% }; p/ ]& j1 e2 w  O% H

+ L, b/ Q* B* @2 J: f嗯，也没别的办法，只能平时多观察多比较了，非常感谢

jingjing6837

我养CIK也出现过这种问题，多数是因为单核细胞贴壁的原因，一开始应该先贴壁1.5小时去除单核细胞，然后收集淋巴细胞，在培养的时候如果贴壁细胞很多，要更换培养瓶弃掉贴壁细胞调整细胞密度，这样CIK不会受到影响，可以扩增起来

kangyi08321

回复 meister 的帖子* w0 m) W1 {- _% Z8 O, W( ]
+ q3 x* z3 g: c+ p% x% r
如果你用的是自体血浆啊，如果是自体血浆没有灭活去除血浆中的纤维蛋白原的话，在培养过程中，会出现纤维蛋白原凝结（原理同血液凝固），细胞会被纠缠起来死掉。用自体血浆的话还是先灭活下吧。同胎牛血清灭活补体一样。只是我不知道会不会灭活掉血浆中的一些有效成分，有没有大神在这方面有研究，请指教！

回复 hwlightning 的帖子
8 `. r5 I1 R. z' p. V8 s( Q: {# J  {" Q
你好，最近养CIK细胞，细胞总是贴壁，悬浮细胞也少，加入CD3和IL-2好像没起到作用，
# q% k( }0 y6 V" g* I* S5 E3 N7 f( Z一直贴壁，吹不下来，没有克隆团产生。CIK细胞一直不会扩增，养着养着就会凋亡，，这会是什么原因？
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我的问题跟你去年碰到的情况一样，不知道你解决了吗，能告诉我问题出在哪吗？