急！急！急！急！CIK细胞实验中出现的问题？？？？

hwlightning

最近养CIK细胞，细胞总是贴壁，悬浮细胞也少，加入CD3和IL-2好像没起到作用，
/ y7 Z, ?% e' E% A, z& X' \一直贴壁，吹不下来。8 [- a4 {" M+ i% [0 s( G
CIK细胞不是悬浮的吗？为什么会还含有那么多贴壁细胞，如果贴壁细胞多，悬浮细胞就少，成团就会更少，和面再补加一支CD3也不起作用。
' C  \! }5 o! U* Q, |还有一种情况是细胞一直不会扩增，养着养着就会凋亡，细胞团也会凋亡，这会是什么原因？

ly200101042

我也遇见过这种情况 而且有时候细胞贴壁还变型了
+ C1 U- x) W1 ]是不是细胞太多太挤了啊 有时候我要是分的细胞多 就会出现这种情况啊

hwlightning

回复 ly200101042 的帖子; K' r& i1 t( u9 L3 S3 r
3 E& _, Y6 H/ k7 w  u7 S. b! Z" s7 |
CIK细胞应该是不贴壁的，也不会因为细胞多而变型，你分离的时候是不是红细胞很多，
  i/ h* k! F$ g- |3 E9 d% D想过怎么去除红细胞没？

ly200101042

我用过溶血素 但有时候嫌麻烦啊

woosheng

! x, F) r% j: j' W5 ]( h

& x' h/ G: n  K4 P! f可能是单核细胞。PBMC里有除了淋巴细胞以外还包含有单核细胞。单核细胞容易贴壁，分化成DC和巨噬细胞。
* G9 z1 [0 t* R$ Q7 K/ v4 W加CD3抗体和IL-2是没有用的。

lyj-0017

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) p, h8 C* e5 s! \你好，我们现在培养CIK液出现你说的这种情况。培养几天后，培养基颜色根本不怎么发生变化，培养液中也有絮状物，像是细胞成团，最后收集的数量非常少。你们现在这个问题找到原因了吗？是如何改善的呢？

ljl1988115

单核细胞比较多吧

meister

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, _- C' l" r/ ^/ R5 T+ L
# }& d* l# d& I5 g- V细胞不长，出现许多絮状，是细胞死了！

lyj-0017

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: |% L; f* S$ l
7 d3 e0 e" h! x% k: j, v+ [# {5 Y- V0 e那么，细胞为什么会自己死掉了呢？是细胞因子没起作用？还是因为营养不足呢？或者别的什么原因？

meister

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6 @% A) Q( V6 _4 x4 q/ o% s
/ e! p% Y3 b  m5 H6 w, g& G细胞会死掉，主要是两个原因， 一是培养基问题。 二是细胞密度过高。
' M" _2 }, j" v3 m8 `我估计你的是培养基有问题。看看IL-2是不是降解了。