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[请教] 全反式维甲酸配制及保存遇到的问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-2-7 17:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我是做细胞培养的,要用全反式维甲酸(ATRA)做诱导剂,在实际操作过程中遇到了一些问题要向大家请教," ]5 l" t4 p) a8 |4 T
1,我买的ATRA是sigma公司的,50mg/支装,用无水乙醇溶解,请问溶解后的ARTA在多少温度下避光保存?保存期多长?在无水乙醇中的全反式维甲酸是不是易变性分解(说明书上说要两周内用完,但这很难做到,实验周期较长)?) A5 T7 z# c! Y) f$ C
2,也有用DMSO溶解的,这种方法可以保存多久?- H/ }* T. Z- I5 @
3,能不能每次取出一部分来溶解配制,这样可以多次配制,但ATRA对光和空气很敏感,每次取出称量配制可能会使其再光和空气中变性,所以不知这种多次溶解是否可行?
; Y, {, k) L# |" \  N. d$ J, a  Z& Y
请各位战友们给予解疑答惑,谢谢。

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沙发
发表于 2012-2-7 21:43 |只看该作者
你如果工作液为0.5微克/ml,那你就配成50微克/ml的储存液。
  |8 i4 b4 C8 v1 _" V: J' M具体可以这样:# ^6 n, n5 F$ w/ R) @( r
1、100MG RA先加入2ml DMSO(这样浓度就是50mg/ml)7 x4 q- e" G+ a
2、然后取出n微升(不要取太多,两星期内用完就行),稀释1000倍,这时即* m4 f& S$ n* V
为临时储存液(浓度50微克/ml); x$ a& p0 W- T
3、用的时候按100倍稀释加就行了(浓度0.5微克/ml)
! ]$ K$ g9 P4 t' {6 a6 X4 Z& Z' \起初DMSO溶解的RA可以-80长期保存,下次用的之前再稀释
- e% h5 K  I9 w* C( b  e3 Y
2 u3 ~! u5 K2 b$ o! g1 k: a: s! w至于惰性气体,我认为如果有条件就尽量,没有条件就按上述方法一次性溶解,把原液分装好保存,就可以尽量避免与空气长时间接触
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藤椅
发表于 2012-2-7 21:44 |只看该作者
你如果工作液为0.5微克/ml,那你就配成50微克/ml的储存液。
7 M8 U3 ~) |2 _* w0 l+ t4 B6 y5 k具体可以这样:/ {& a! G7 F  _
1、100MG RA先加入2ml DMSO(这样浓度就是50mg/ml)0 `3 |/ M( b- h" r
2、然后取出n微升(不要取太多,两星期内用完就行),稀释1000倍,这时即5 M" J0 o' y% l3 E  Q
为临时储存液(浓度50微克/ml)
% ^9 k( m7 A. G, [3、用的时候按100倍稀释加就行了(浓度0.5微克/ml)8 W: e( T+ v4 x$ ?3 ]( ~$ W( T6 |
起初DMSO溶解的RA可以-80长期保存,下次用的之前再稀释
# J* x* M, [" O8 e9 [3 ]! Q! i" W
至于惰性气体,我认为如果有条件就尽量,没有条件就按上述方法一次性溶解,把原液分装好保存,就可以尽量避免与空气长时间接触

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板凳
发表于 2012-2-8 00:38 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 微笑ci 的帖子  X/ \. U6 B: d) q4 [/ s$ p. N7 J8 }

: K6 }% S1 I  d* c暂时清除你的积分 解释一下 为什么你的问题和网上一个2008年的老问题一样,只是重新编辑了一下顺序?

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报纸
发表于 2012-2-19 10:14 |只看该作者
本帖最后由 微笑ci 于 2012-2-19 10:33 编辑
( U0 g- k: m* T8 k% T$ ~5 A' t, P
回复 细胞海洋 的帖子& u/ F# n. ^5 m( m$ ^8 _- e

- Z% F9 o3 c6 H; E$ i+ j解释:您真的很细心,网上08年的这个问题我也搜到了,但并没有针对该问题的答复。我是因为要用全反式维甲酸来做神经诱导用,说明书我看了之后有一些问题不明白,才在网上搜了这个问题,网上的说法不一,我只是想找用过的人给我个确定的答复,而08年的这个问题也恰巧包括我要问的,所以就偷了个懒~  请问还有疑问吗?

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小小研究员

地板
发表于 2012-2-20 09:06 |只看该作者
回复 微笑ci 的帖子
3 a7 J* @  U9 i$ A
; Z8 Y, k4 c. P2 [, \, Q已经撤销扣分 以后转帖别人的内容,一定注明作者和出处

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发表于 2012-2-20 20:15 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子& K% G- X* O2 T; N+ u; s5 x

# p5 n6 f7 P# f0 O多谢版主!新手上路,不懂规则,请多包涵!

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发表于 2018-3-9 21:05 |只看该作者
刚好用到这个,学习一下。
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