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[请教] 全反式维甲酸配制及保存遇到的问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-2-7 17:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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我是做细胞培养的,要用全反式维甲酸(ATRA)做诱导剂,在实际操作过程中遇到了一些问题要向大家请教,
  ^" _, D" `3 N# f  `2 Z* ^1,我买的ATRA是sigma公司的,50mg/支装,用无水乙醇溶解,请问溶解后的ARTA在多少温度下避光保存?保存期多长?在无水乙醇中的全反式维甲酸是不是易变性分解(说明书上说要两周内用完,但这很难做到,实验周期较长)?
5 q1 h  h  V5 w2 Y' `2 e- s( X2,也有用DMSO溶解的,这种方法可以保存多久?7 [5 c4 ]' A6 ]8 J; P4 i6 V8 w$ W
3,能不能每次取出一部分来溶解配制,这样可以多次配制,但ATRA对光和空气很敏感,每次取出称量配制可能会使其再光和空气中变性,所以不知这种多次溶解是否可行?) V8 U9 z+ f. q$ W9 X4 Q$ N6 \
. S* x! s9 J5 T  J
请各位战友们给予解疑答惑,谢谢。

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沙发
发表于 2012-2-7 21:43 |只看该作者
你如果工作液为0.5微克/ml,那你就配成50微克/ml的储存液。& }* i' q- h2 ~7 n; Z
具体可以这样:( R9 F6 O5 w0 ?8 k( o
1、100MG RA先加入2ml DMSO(这样浓度就是50mg/ml)% O6 X$ }' C7 ^4 o2 _- Y& `* o
2、然后取出n微升(不要取太多,两星期内用完就行),稀释1000倍,这时即
- U8 X3 r0 _' c, @6 o为临时储存液(浓度50微克/ml)
9 j& N1 T  @' [3 i6 \$ ^3、用的时候按100倍稀释加就行了(浓度0.5微克/ml)
1 [) H( }; W# v8 \$ x起初DMSO溶解的RA可以-80长期保存,下次用的之前再稀释8 S& g) T' B' _: @: H

% Q# S$ \( K1 ^) f至于惰性气体,我认为如果有条件就尽量,没有条件就按上述方法一次性溶解,把原液分装好保存,就可以尽量避免与空气长时间接触
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藤椅
发表于 2012-2-7 21:44 |只看该作者
你如果工作液为0.5微克/ml,那你就配成50微克/ml的储存液。
5 j( J! |% ]% f# f: q& J6 c具体可以这样:
6 n& O. y1 k' i% Z; z) x+ Z1、100MG RA先加入2ml DMSO(这样浓度就是50mg/ml)
+ t. J" J9 p: h1 I9 Q8 z$ t2 L2、然后取出n微升(不要取太多,两星期内用完就行),稀释1000倍,这时即
3 T( [" u5 p3 J* Y为临时储存液(浓度50微克/ml)' s/ J7 |3 e* ^+ u
3、用的时候按100倍稀释加就行了(浓度0.5微克/ml)5 S& s* \+ E- i* c
起初DMSO溶解的RA可以-80长期保存,下次用的之前再稀释$ W$ _; @! W, G% Z5 _3 W& {
+ \, m, @8 O6 J4 ~/ x( W
至于惰性气体,我认为如果有条件就尽量,没有条件就按上述方法一次性溶解,把原液分装好保存,就可以尽量避免与空气长时间接触

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板凳
发表于 2012-2-8 00:38 |只看该作者
回复 微笑ci 的帖子
* Q2 d/ x6 M$ ^
4 ~" }# p9 y8 I暂时清除你的积分 解释一下 为什么你的问题和网上一个2008年的老问题一样,只是重新编辑了一下顺序?

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报纸
发表于 2012-2-19 10:14 |只看该作者
本帖最后由 微笑ci 于 2012-2-19 10:33 编辑
5 ]9 q( ^+ n1 Q2 A) k9 T- r& n: P
) r- w# g& r+ }回复 细胞海洋 的帖子
* G, i7 @! j6 ?7 x. c& _. W6 o3 m; p6 T# ~6 ^8 c( S& O* v5 l
解释:您真的很细心,网上08年的这个问题我也搜到了,但并没有针对该问题的答复。我是因为要用全反式维甲酸来做神经诱导用,说明书我看了之后有一些问题不明白,才在网上搜了这个问题,网上的说法不一,我只是想找用过的人给我个确定的答复,而08年的这个问题也恰巧包括我要问的,所以就偷了个懒~  请问还有疑问吗?

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小小研究员

地板
发表于 2012-2-20 09:06 |只看该作者
回复 微笑ci 的帖子
( H% v4 `# Q* h( T  W# L% I
1 e) v4 l2 s4 l# `1 M7 ^) y已经撤销扣分 以后转帖别人的内容,一定注明作者和出处

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7楼
发表于 2012-2-20 20:15 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子# I0 Q( D' e5 t+ E9 F  \, ^+ T
/ J8 t3 B+ }  ]; u
多谢版主!新手上路,不懂规则,请多包涵!

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8楼
发表于 2018-3-9 21:05 |只看该作者
刚好用到这个,学习一下。
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