请问丝裂霉素C如何保存

ying

请问一下诸位大侠，丝裂霉素C溶解之后该如何保存？( {: k" A2 k* g6 m
我在各种来源的protocol上看到的，说溶了之后可以4度保存一个月，但如果有沉淀析出则扔掉。后来又有同学告诉我，可以放在-20避光放很久很久，拿出来还可以用。挺想如此做但又不敢贸然如此，所以想请教一下诸位。. ^+ ^" u0 C% Z% Z% e
还有，就是1个10cm碟子要加多少毫升的10ug/mL的MMC？用一次之后可以回收重复使用多少次？# e* n) m1 K- n8 ?6 s
做MEF用10%还是15%FBS?要不要灭活？加丙酮酸钠和不加有何差别？要加glutamin吗？
' X8 H" H7 X; N- k1 z   求高手解答之  谢谢
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xiaoqi

-20度避光保存，长期存放的话最好加点BSA。另外，你配制的丝裂霉素C应该是母液吧，假如说10cm皿需要加4ml的培养液的话，则需要根据你母液的浓度算出需要添加多少母液才能达到10ug/ml。就是一个C1*V1=C2*V2公式的运用。

lingminliang

-20℃避光可以长期保存，一般母液是配成1mg/ml，一个10cm的培养皿加3.5ml或者是4ml培养基，那么加母液应该是35或者40μl。用完一次之后直接弃掉，不重复利用。做MEF用10%FBS，我们做的是不灭活。丙酮酸钠应该是提供碳源的，要加glutamin。

mansnoopy

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母液有紫色结晶是会出现这个现象的，没有问题。母液一般负20保存，工作液4度即可，注意避光，防污染

zhusealin

我们做MEF用的是不灭活的10%FBS，基础培养基如果已经含有丙酮酸钠和谷氨酰胺了，可以不加

573639471

我是配成500μg/ml母液分装，浅浅的蓝色，-20保存，久了会有黑色沉淀不影响使用的。用时稀释到工作浓度10μg/ml，使用量个人感觉覆盖过细胞就可以，T25的瓶子我用过2ml 3ml 5ml 差别不大。
! `" C% p! v' a( C( ]0 r8 QFBS10%，不灭活，另加glutamine和非必须氨基酸

sarah19860420

回复 573639471 的帖子0 j8 \8 ?. K; D6 y* T  p

+ |) l" L) u& r" Y9 U: g9 h我的分好的50ug/ml的MMC在4°放了不知道多久的时间，是呈现淡淡的紫色，对吗？0 `, {' F3 f" x6 e4 ~+ L6 h
另外有的人说PBS洗5遍后，在消化等他铺到单层，再接种细胞，到底是什么样的顺序，搞不懂了。是不是可以直接洗后就直接接种细胞啊？

573639471

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! k+ I) e, l9 o8 m$ F2 A1 ~" b) l淡淡紫色没有什么问题，但是如果一直放在4度，久了恐怕会失效的
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0 m% g! a2 p3 s; t( d, Z9 _灭活后可以直接种，但是尽量洗干净，我的方法PBS洗5遍后，加入培养液放半小时或过夜，直接接种了

jkfly

母液一般-20摄氏度保存一年可以，工作液4摄氏度可靠保存1个月，我三个月的也用过，可以的，我觉得问题不大

YYQ6301

我们一般都是4度避光保存，时间不要太长，问题不大