急求神经球荧光方案

changbo529

神经干细胞贴壁培养后72小时视野中出现如图细胞，请问这是少突
' w* d  d0 O- ~( K0 g, {胶质细胞吗？还有一个问题就是悬浮培养的神经球怎样做免疫荧光和计数？急求

changbo529

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该图是少突胶质细胞吗？

aifei001

请教楼主，神经干细胞怎样贴壁培养？换培养基还是换别的条件，我们想让神经干细胞贴壁，总也不贴。谢谢

changbo529

我用的是多聚赖氨酸包被，但一贴就分化，但我又不想让它分化，所以我现在也很无语

changbo529

回复 aifei001 的帖子& m9 O0 _/ L3 R& u' ^  [- S
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我用的是多聚赖氨酸包被，但一贴就分化，但我又不想让它分化，所以我现在也很无语

aifei001

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谢谢。我也一样无语啊，看来还是文献看的少。希望问题都能克服！

jessewill

回复 aifei001 的帖子) n( }5 f* y  ~
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我觉得是你的细胞状态不行了吧，也就是说你悬浮培养的神经球已经出现了一定的分化，因此贴壁之后，你就很快看到了神经干细胞的分化。7 H: G' {) r. a+ G/ E
如果保持着多能型的干细胞，即使贴壁也是不会分化的。; Z. a& ]/ k6 r
所以还是从培养NSC的条件上去考虑。

jessewill

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' J  F' q& O. {8 s  t. `( G* j我觉得是你的细胞状态不行了吧，也就是说你悬浮培养的神经球已经出现了一定的分化，因此贴壁之后，你就很快看到了神经干细胞的分化。  O1 d3 g- z( ]* Z1 _
如果保持着多能型的干细胞，即使贴壁也是不会分化的。$ B" H& k  o: c
所以还是从培养NSC的条件上去考虑。

jojomayer

jessewill 发表于 2012-3-26 18:00 3 _& p2 N; S! S# Z
回复 aifei001 的帖子  [2 L' N1 [8 `* s+ Z: n% @
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我觉得是你的细胞状态不行了吧，也就是说你悬浮培养的神经球已经出现了一定的分化， ...

; P+ ]7 X: |# I; P请问一下你是如何通过镜下观察判断细胞有没有分化的？
6 f. A! e# E" V- S9 r$ m& o( x楼主图中的细胞是什么细胞？如果细胞没有分化，镜下应该是什么样子？与分化的有什么不同？
, M4 `4 L1 U2 q2 Y谢谢！

justin03

感觉楼主的图不是神经干细胞了，悬浮培养神经干细胞一般会成球的，贴壁培养的话也会成球的，细胞有短突触，不会像图片那么明显的突起的。会不会是取材或传代的过程中有接触到FBS，让细胞分化了？