急求神经球荧光方案

changbo529

神经干细胞贴壁培养后72小时视野中出现如图细胞，请问这是少突
6 w3 o" s% Y0 \) T2 J  Z; I, r胶质细胞吗？还有一个问题就是悬浮培养的神经球怎样做免疫荧光和计数？急求

changbo529

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/ ^1 T6 [/ r6 n5 [$ _该图是少突胶质细胞吗？

aifei001

请教楼主，神经干细胞怎样贴壁培养？换培养基还是换别的条件，我们想让神经干细胞贴壁，总也不贴。谢谢

changbo529

我用的是多聚赖氨酸包被，但一贴就分化，但我又不想让它分化，所以我现在也很无语

changbo529

回复 aifei001 的帖子# C( n9 [, }; u7 d. o
" u: f7 \0 P9 e( Z, o/ z( ]! z
我用的是多聚赖氨酸包被，但一贴就分化，但我又不想让它分化，所以我现在也很无语

aifei001

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' y  G$ }' U; v0 I5 d4 R/ Z; I7 V4 p
  _! a) |4 R. {5 T谢谢。我也一样无语啊，看来还是文献看的少。希望问题都能克服！

jessewill

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$ q6 D( |" E* c4 C2 T' F$ b& U+ C  a' K
我觉得是你的细胞状态不行了吧，也就是说你悬浮培养的神经球已经出现了一定的分化，因此贴壁之后，你就很快看到了神经干细胞的分化。
- `0 I3 C: z) I5 P( y5 ^3 S( W, P9 z如果保持着多能型的干细胞，即使贴壁也是不会分化的。4 D* q& N- ~) L* A4 G0 p+ v5 |2 t* L
所以还是从培养NSC的条件上去考虑。

jessewill

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我觉得是你的细胞状态不行了吧，也就是说你悬浮培养的神经球已经出现了一定的分化，因此贴壁之后，你就很快看到了神经干细胞的分化。
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所以还是从培养NSC的条件上去考虑。

jojomayer

jessewill 发表于 2012-3-26 18:00 1 {) N. D+ O7 [" j7 ^
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: Z/ i- T' k! h' I6 n0 d5 P3 G# L) r6 a! B7 d: D! V
我觉得是你的细胞状态不行了吧，也就是说你悬浮培养的神经球已经出现了一定的分化， ...

! ~, s) E( o* S- U* b请问一下你是如何通过镜下观察判断细胞有没有分化的？
$ M9 Q# R. ^! o) l- Q$ O! d4 L: J楼主图中的细胞是什么细胞？如果细胞没有分化，镜下应该是什么样子？与分化的有什么不同？9 G$ E" {& i+ L
谢谢！

justin03

感觉楼主的图不是神经干细胞了，悬浮培养神经干细胞一般会成球的，贴壁培养的话也会成球的，细胞有短突触，不会像图片那么明显的突起的。会不会是取材或传代的过程中有接触到FBS，让细胞分化了？