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楼主: 花饶然
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求助为什么我养出来的CIK细胞集落大部分贴在壁上啊,急!   [复制链接]

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11楼
发表于 2012-5-7 16:32 |只看该作者
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做了上千份外周血CIK,顽固贴壁的遇到过2-3次,贴壁倾向的遇到过几十次把,原因不知道。
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12楼
发表于 2012-5-10 15:34 |只看该作者
回复 花饶然 的帖子: O8 j, P( K& c* w; N

3 H7 ?2 v4 W. x7 k( \& `, L5 v+ R) g请问你的血清比例是加多少啊?

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13楼
发表于 2012-5-10 15:40 |只看该作者
回复 yanlu98 的帖子
1 I; J2 t. ]( X% c
% r- W+ O1 q: M, x自体血浆用10%,起初很必要的,由于血浆不多,中后期就没得加了,不过对CIK细胞没有太大影响了
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14楼
发表于 2012-5-10 15:42 |只看该作者
回复 我是丁香 的帖子7 ^) U  U- O' ]6 @9 u

0 y* e; h6 U0 l0 ]- y* m请问大侠做过脐血诱导CIK没有啊?另外,CIK细胞老化的标志,以及原因有哪些啊,盼赐教!

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15楼
发表于 2012-5-14 19:58 |只看该作者
回复 花饶然 的帖子
6 l5 l5 s! A3 f1 d' n
; W0 v+ n5 Z: E5 }6 Q6 e抱歉,么有经验

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16楼
发表于 2012-5-18 12:02 |只看该作者
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17楼
发表于 2012-5-24 15:09 |只看该作者
回复 花饶然 的帖子
1 X3 ?5 K; S: X. \2 \# l/ M5 g9 n; p, k* I1 ~* s
因子加的不够或者不对是有可能贴壁的
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18楼
发表于 2014-4-28 15:41 |只看该作者
我培养的细胞也是这种情况,第五天的时候发现贴壁很多,细胞呈长条状,之前的细胞这种情况很少,最近一批出现的很多都是这种情况,我想知道这是什么原因,是不是跟因子有关?( k4 l9 ^: `/ {
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19楼
发表于 2014-4-29 09:33 |只看该作者
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3 H/ ?+ [# L& z- U7 B: Y) m: l6 p; H* K7 G
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20楼
发表于 2014-4-29 09:59 |只看该作者
我们培养的外周血CIK没有出现集落贴壁现象,我们的方法是:抽取外周血50ml,用ficoal分离并收集PBMC,因为是临床用的,我们都是用生理盐水冲洗的,然后以1 ×106 /ml密度,用GT-T551,加入IFN - γ1000u /ml, 24h后加入 IL - 2 1000u /ml, CD3 50ng/ml,CO2培养箱中常规条件培养,以后隔天计数换液同时补加rh IL - 2 1000u /ml,一般培养14d-18d,回输前两天做内毒素,真菌,支原体,细菌检测,流式做表型等,细胞总数一般能达到2.0.X1010,收集最好只离心一次,做个存活率,一般在90%左右,分四次回输。仅供参考,谢谢!
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