mouse ips 诱导心肌细胞的方法

redmaple

求mouse ips 诱导心肌细胞的方法！

cochongg

将IPS悬浮培养制备类胚体，采用类胚体介导体外自由分化与定向诱导分化（添加RA+DMSO诱导物）

redmaple

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5 ]* h4 J9 C* t; D" N1 ]. f+ z/ w能具体点么？; D5 X/ Z; R, D

cochongg

1状态好的IPS
' n/ [; }) E, Q! t# i" |9 a2 t2 @ 2早上换液. \: m( b& N: v0 Z0 y" Q$ b
3四小时后消化
3 v+ R! P1 {0 F. c5 E; r3 k 4重悬后转到培养皿上
8 z+ Y$ _( T& L1 G: [' l( s 5六十到一百二十分钟沉淀' f% }2 |6 w; L" u/ u" ^
6收集悬浮细胞+ I/ n* W* G0 J/ [
7重复5、6
5 `3 K0 B/ C1 Q) U7 X 8接到普通不帖壁培养皿中
& ]; ~2 s1 Z- w; e4 u& Q/ S 9第二天换液（小心换，细胞没贴壁的）
: Q3 K, s9 W$ j) i+ j; p% e 10两天后吸出囊胚
4 f+ N/ Q/ q0 J2 j8 f% S 11接到明胶预先包被的贴壁培养皿中- P" j4 g/ J/ B% s3 d$ D  N2 K
12三天到五天换一次液
6 C9 m6 x* W, Q8 {5 k 13不要天天镜检，多看无益$ Q: B5 x0 n% O+ a0 k
14两周时间内细胞就跳了1 I( d: h: Q7 w5 |, I- Y$ g
; C! [* _4 x! o0 ~6 z' S$ Q
注意：培养基一直用无LIF的普通高糖就ok了，血清加15%吧，添加RA+DMSO诱导物（这个要斟酌考虑浓度）
# n" c, o; P. ]0 o  t) U 长得快

cochongg

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13不要天天镜检，多看无益2 D! ?% W+ N2 S4 q. A
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长得快
5 {& E) A3 y4 V4 v' G! [. K. k+ F( i* O

cochongg

还要注意一点细胞的状态很重要，成败关键

细胞海洋

http://www.stemcell8.cn/search.p ... mp;searchsubmit=yes

dymme

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# J, j9 L+ _" t# ?2 B' L3 D0 k: J7 S6 j6 C6 ?
你好，我想请问一下我们什么时候加诱导剂呢？是制备好拟胚体之后再加呢，还是准备制备拟胚体的时候就加诱导剂呢？谢谢啦~

ligangtiancai

回复 cochongg 的帖子" f4 x! u+ h' m4 ~/ j% d
2 k7 i$ h% i! u! g# a1 O* [
你好，我想问一下是否有必要使用悬滴法制备EB？因为EB的过程比直接悬浮麻烦很多，如果效果类似的话直接悬浮会方便很多，想！

ligangtiancai

回复 cochongg 的帖子& K2 }8 `4 L; j" }! E) }6 R

7 k3 l+ y. J$ E* `1 f5 e打错，是谢谢！