siRNA连接何种载体转染大鼠骨髓间充质干细胞？

orchard

我最近想做大鼠骨髓间充质干细胞中的两个目的基因的沉默，同时还想做体内实验，但是分子生物学这块刚刚接触，有很多不懂的地方向大家请教。如果想选用RNA干扰的慢病毒载体做稳定转染，请问大家都有用过什么载体呢？

燕北飞

GV 慢病毒载体系列、pHelper 1.0 载体和 pHelper 2.0 载体三种常用质粒。

刘森泉

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  u' j: `% w7 A0 S
6 M$ Y! ~5 L0 x2 m& z请教下，做过表达的慢病毒表达载体和siRNA敲降的的慢病毒载体是一样的么？如果不是，两者差什么？

zack

刘森泉 发表于 2012-6-7 08:49 8 k# T& Y3 F; Q) ~8 b, O
回复 燕北飞 的帖子$ x7 {  W# q" K% Y' M3 b
1 I  m# b3 M  S- z& H$ R1 p
请教下，做过表达的慢病毒表达载体和siRNA敲降的的慢病毒载体是一样的么？如果不是，两 ...

2 q8 q6 V4 E2 A0 q1 ^8 d/ {+ N可以用同样的慢病毒辅助质粒去包装。

刘森泉

回复 zack 的帖子0 y. U1 |4 ^$ m) i* Z

- k; r8 y$ A( A2 y辅助质粒共用是可以的，我意思是构建表达质粒的载体，对于高表达的和siRNA敲降的是否一样。谢谢！

燕北飞

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9 l- ], K& S( R
# R( q( x8 p+ b" B9 \; n1 K不一样，高表达的载体要选择好的质粒，对启动子的要求很高，如果想让过表达效果明显，需要包装腺病毒或者AAV。

刘森泉

回复 燕北飞 的帖子. F) b8 _  b  k& }

. c2 V7 w% z6 x/ y7 O那可以用过表达的载体来构建siRNA的表达质粒？

燕北飞

回复 刘森泉 的帖子* Q( J7 M1 {1 A1 c

3 |; S+ t0 G! u7 w如果质粒效果好的话，大家就不用包病毒了。

燕北飞

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, e7 K& J! w9 u3 [6 p, [) U0 y) U/ e  ~4 T8 e& n' F
关于质粒和病毒的分类和功能，我这里就不想多说了，病毒转染干细胞专区会提供给你很好的解释。

orchard

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4 Y# A- f* Z5 ]( P2 D( C- w" N3 x& n/ b
请问你们一般是自己构建还是找公司做呢？ 如果找公司的话哪家比较好？谢谢！