荧光原位杂交（fish）探针设计原则和方法

xxp1246087085

谢谢大家，这两天忙考试了，没上网，非常感谢

hn1022

我也要做胚胎的RNA FISH ，想请教一下protocol呀！谢谢

l19rna

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+ @" V* Y2 ?+ z6 \8 i
不同天数的胚胎的ptotocol会有细节上的差别，我做的比较早期，建议参考nature protocol上的文章：
7 r) S- ]$ V" u# ~! H0 U3 [; tTitle：An optimized procedure for whole-mount in situ hybridization on mouse embryos and embryoid bodies( _3 ]4 F6 P$ z& ?* @8 I. D( T

无心

无心

想了解

icebaby

做ISH，最常用的还是Riboprobe吧？我想FISH也应该是这样的。我最近要做ISH，探针的话想找个公司来做。

doctorrobin

我想请教一下想做一个对照内参探针找什么基因比较好 本人刚接触ish

细胞海洋

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1 k0 S: n; e7 R6 h
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l19rna

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7 X, r$ ?% c, L2 l# g
3 I: j+ A6 U/ b7 O我一般是用别人已经发表的探针，而且其表达谱是公认的，才用来做阳性对照；/ {6 K0 l7 ~- K- Y
阴性对照就选择cRNA的互补序列，这个在你的cRNA载体上转录出来就行。

l19rna

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8 W6 |0 H: D- Q# c7 Z+ G
' ^0 \  C) C# ]FISH已经有很多更高效的方法。尤其是做单细胞且定量的FISH。其探针也有很多种，除了传统的，还有50bp长度，19-24bp长度探针，等等