荧光原位杂交（fish）探针设计原则和方法

xxp1246087085

谢谢大家，这两天忙考试了，没上网，非常感谢

hn1022

我也要做胚胎的RNA FISH ，想请教一下protocol呀！谢谢

l19rna

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2 X- N" c  ^7 G. E: U不同天数的胚胎的ptotocol会有细节上的差别，我做的比较早期，建议参考nature protocol上的文章：   G) L9 A2 _3 T1 O
Title：An optimized procedure for whole-mount in situ hybridization on mouse embryos and embryoid bodies, L- E, Q& ~" I* x7 t, E

无心

无心

想了解

icebaby

做ISH，最常用的还是Riboprobe吧？我想FISH也应该是这样的。我最近要做ISH，探针的话想找个公司来做。

doctorrobin

我想请教一下想做一个对照内参探针找什么基因比较好 本人刚接触ish

细胞海洋

回复 doctorrobin 的帖子8 f7 Z# {1 M) @& D
" d& o+ l4 V6 i1 m& w, e: `
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l19rna

回复 doctorrobin 的帖子) C4 y. h. C  `$ G4 ^
/ E/ U2 U* h7 \9 V8 `% J7 A
我一般是用别人已经发表的探针，而且其表达谱是公认的，才用来做阳性对照；
+ ~4 W6 {( q- [) V2 I, ?9 T阴性对照就选择cRNA的互补序列，这个在你的cRNA载体上转录出来就行。

l19rna

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/ y( K6 H" X' o. R/ I4 u; |" w
$ S& t# C- N+ B2 A8 v8 r- DFISH已经有很多更高效的方法。尤其是做单细胞且定量的FISH。其探针也有很多种，除了传统的，还有50bp长度，19-24bp长度探针，等等