荧光原位杂交（fish）探针设计原则和方法

xxp1246087085

准备做RNA FISH，白手起家啊

l19rna

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8 S+ D4 t8 N! r8 P. F2 u. m' d) l7 V. K3 w6 b/ t
兄弟加油，我已经搞定了

xxp1246087085

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$ A& a4 L% J- Y' u" G3 t) }. m2 R' g& E5 M
以后还要多多请教啊

l19rna

回复 xxp1246087085 的帖子1 q  Y) R' F, n% O1 W5 C3 J2 j, d: h

# E* R+ N9 Q0 ~* _我现在只会做whole mount ISH of mouse embryo，不知道能不能帮到你了，呵呵

xxp1246087085

回复 l19rna 的帖子: k  {8 m+ ?- F9 g' `# z! ~- Q6 }: R

1 }+ v, z5 t' C: X: Y我现在设计的500bp长度的探针，末端会有1-2bp的不匹配序列，不知道对结果有影响没有，我用的RNA探针

l19rna

回复 xxp1246087085 的帖子+ o6 F% i+ m8 d

3 L8 X6 q6 ~7 i0 b木有影响，放心吧。你做体外转录时候还有载体上的一小部分序列呢，不会影响结果的

flybear

FISH要求的长度是1000-1200bp左右吧，如果做细胞的可能要考虑你的转化效率了！！！片段太短，特异性很差，这个楼主要考虑了！！！

flybear

做这种fish，先弄最好做的，比如actin等，做个阳性对照了！！！出来了，再做目的基因的！！！！

l19rna

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$ u/ I6 H% Z0 X& s3 Q0 c+ P, X% P: _1 d* W. w3 k% c
嗯嗯，非常感谢分享经验

xxp1246087085

谢谢大家，这两天忙考试了，没上网，非常感谢