关于mES N2B27 feeder-free serum-free培养

zpzp0312

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* e2 P( ~# ^  x/ X0 U4 X我回帖的主要意思是matrigel不一定适合细胞贴壁
4 w# f  D% K* E% @; \. R虽然有这样的报道
7 b" y- S- P. V/ C毕竟matrigel比较贵，如果有其他解决方法就没必要花那么多钱买matrigel去试验

wbj1983

回复 vegetax4132 的帖子9 H5 D) l+ M7 L# r) ]
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“N2B27+LIF+2I+β-巯基乙醇+Glutamax+双抗”这个培养基是没问题，试着可以加一下NEAA，我是这么做的。还有培养皿一定选择贴壁效果最好的那种corning的（这也是我自己用的）。铺0.1%的明胶37℃20-30min，我们培养的贴壁效果挺好，根本不用需要matrigel，matrigel相对来说还是很贵的。还有希望您尽量用进口的ES medium所有组分，国产的在这方面还是欠佳（不过我觉得您也肯定用的进口的）。还有，您冻存ES的时候可以用90%FBS+10%DMSO效果可能会好一些。纯属个人建议，我是这么做的效果不错，来这儿和大家分享一下，希望对你们的实验有所帮助！

vegetax4132

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2 b" b2 Z# H. ^/ m- G十分感谢，我最近也把NEAA加上了，我发现用100%的FBS包被板子效果很好。

坏蛋蛋阿布

用无血清培养加血清铺皿会不会有很多血清中不知明的东西上去了，有没有试过gelatin铺皿过夜

sunnyhuan0629

如果真的是feeder-free的培养的话，建议先铺一层matrigel的，这样克隆团才会贴壁生长。另外，培养基的话，我们使用mTeSR1和PSGro都没有问题的啊~

labghost

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这血清有没有谁试过用HSA代替呢？