大家养的DC能达到多少的数量

Tevirly

" U" _7 Z0 R; S3 i% f+ ^

& s3 O/ L2 y0 F* l4 G大家好，我想了解一下大家养人的DC可以收获到多少的细胞，感觉本人的养的DC总是比较少，大约80ml血，分离后，养DC到第六天仅有5~16X10^5，是在10cm的培养皿中养的

一米阳光66

大约是5X106次方吧！150ml血

Tevirly

回复 一米阳光66 的帖子  Z/ r7 @( O/ t4 n+ ]

+ t  {( ?9 d2 b求方法求方法~~

wagumaxida

Tevirly 发表于 2012-9-7 15:06 $ E3 q! ?8 k+ M, E% h  A
回复 一米阳光66 的帖子
  B1 O/ o1 u+ Y' x1 n; z: n1 ?% t+ k$ e, P, t7 e
求方法求方法~~

& V- R' R6 ]: T; N+ s# F- I2 E
我之前的方案
+ W) E7 D- d4 j  y  J2 f8 [. g( mDC培养：外周血分离单核细胞后加因子诱导7 z/ v6 |5 U: s( K
d0：分血，加因子GM-CSF和IL-4，100ng/ml* s  K4 f8 j2 X
d3：补充因子至全量: @) Z) R" A5 o" a
d6：抗原负载+ n, K$ S4 }& U$ w
d7：刺激DC成熟，100ng/ml的TNF-α，100ng/ml的IL-6和25ng/ml的IL-1β

Tevirly

回复 wagumaxida 的帖子* W' c* T( S0 L  }" T- M# c
8 a2 V2 R# @; f' L. T. A) y
好的，谢谢~！

apai2003

外周血中单核细胞比例直接影响树突状细胞的得率，我们一般最终获取的树突状细胞数量大概是PBMC数量的5-10%

莫邪小仙

回复 wagumaxida 的帖子  o) {0 u2 F9 t2 b) I
; J& Y: b: Z: _1 ^5 b# m0 ]
想问下加入IL-6 有没有参考文献？看过一篇文献上说IL-6 能将单核细胞从DC分化成巨噬细胞，这样在培养体系中加入会不会影响DC的数量和状态？

cheeray

1-2  *10的7，差不多每次都是这个数量。。

xiaolizhang87

回复 Tevirly 的帖子9 q- O& m  N  r& q. ?/ b
0 \/ ?' o6 }: w* g
大概是5-8*10的6次方吧，60ml血~~

Tevirly

回复 cheeray 的帖子
3 S) v5 D. |7 [2 i! G3 U+ R3 ^3 K0 k$ h1 w3 l" V1 C/ Q, t
不会吧，这么多？多少毫升血得到的，你是用磁珠分离法吗