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楼主: chenchunlei
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怎么将出生后0-3天雌性小鼠的生殖细胞和颗粒细胞分开? [复制链接]

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11楼
发表于 2012-9-11 14:28 |只看该作者
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回复 chenchunlei 的帖子' a& M' i1 N1 Y! _

3 I/ ~! O3 r7 R! Y* n7 O  V: a刺破卵巢后,释放的出来的卵丘细胞,然后用透明质酸酶消化5分钟,吸去卵母细胞,剩下的基本都是颗粒细胞了。
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12楼
发表于 2012-9-11 22:12 |只看该作者
回复 hcluo 的帖子
3 T1 I1 u/ e  U# C% o6 v9 z6 @0 F# m
这时候的颗粒细胞和卵母细胞直径差不多吧
$ \8 s! g9 W& {0 x
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13楼
发表于 2012-9-11 22:21 |只看该作者
回复 aulenuyah 的帖子5 B+ \3 q' x5 g1 y6 g0 S2 K
+ ?. Z  m2 @) [9 Z& C! R5 x
也用过胶原酶啊
7 x( z5 Y2 z; X7 q1 G

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14楼
发表于 2012-9-12 00:37 |只看该作者
回复 chenchunlei 的帖子: t/ D0 k* Y+ J

3 S9 s. R- A( x  v, Z5 m0 C9 y* V效果也不行吗?
) K0 O' W8 N  V& v7 f: ?用的什么浓度的?其实最好用的好像是透明质酸酶,专门消化颗粒细胞的
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15楼
发表于 2012-9-12 00:39 |只看该作者
回复 hcluo 的帖子9 W! k; _( e  ^, m- P

+ w9 l- p2 k: h. ]. d3 @楼主要用的是0-3天的小鼠,那么小的小鼠不会有什么有腔卵泡的发育,所以根本没有卵丘细胞的。不然的话,先超排,然后刺破还是会挺多的
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16楼
发表于 2012-9-12 11:18 |只看该作者
回复 aulenuyah 的帖子
& Z: i9 m7 u: g% a3 a
% M7 `* y; y$ S7 `谢谢3 G$ o# y9 o' G! k* I

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17楼
发表于 2012-9-12 11:20 |只看该作者
回复 aulenuyah 的帖子; i3 k1 w& _: [
3 a: }/ }- F' Y6 |5 M( L1 [( v
那时候应该Cysts应该刚解聚完吧,应该都处于原始卵泡阶段。
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18楼
发表于 2012-9-12 16:02 |只看该作者
回复 chenchunlei 的帖子
. d+ e7 m) k2 B0 ^& Q0 L8 V* P3 k  K  w$ Q
所以个人觉得如果需要颗粒细胞,只能通过获得原始卵泡或者腔前卵泡的方式获得。这种方法我试验过,获得腔前卵泡之后,在培养液微滴中培养,之后成功迁出颗粒细胞了
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