怎么将出生后0-3天雌性小鼠的生殖细胞和颗粒细胞分开？

chenchunlei

贴壁？最好能有实验操作步骤

aulenuyah

你这是要分离卵母细胞吗？老鼠太小了呀

chenchunlei

回复 aulenuyah 的帖子- |9 z0 h7 n% |9 v! V

# O1 ]6 L* }; q: q; e; K5 E要颗粒细胞

aulenuyah

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什么样的颗粒细胞？就是腔前卵泡上面的颗粒细胞吗

chenchunlei

回复 aulenuyah 的帖子: ], _1 k: p$ S" s+ w
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就是将0-3d卵巢消化后怎样获得颗粒细胞9 A1 x5 V$ l0 u3 D& W- l

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子5 y4 W& H1 |" s3 U1 v. l* @
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我以前取过成年小鼠的。建议你不要直接消化。先在显微镜下将卵巢用异物针撕碎，然后用0.1%胶原酶吹打消化，之后再显微镜下将腔前卵泡检出，然后单独消化腔前卵泡，这样得到的颗粒细胞会比较纯净。因为你要做的是幼鼠，尚无有腔卵泡的发育，只能取腔前卵泡，而且不管怎么样，细胞都不会很多，如果细胞需要量大的话，就只能多杀老鼠了。。。

chenchunlei

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谢谢
1 l5 Z9 u6 v* R, |4 V$ U之前用了四个卵巢一消化离心后几乎没有颗粒细胞了

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子& R& g# h5 f+ q, A9 y

! o" Q( G" _- ~如果这样的话，试试看不离心

chenchunlei

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那岂不会有TE在培养液里
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aulenuyah

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% h5 Q+ k( S, i怪不得你弄不出来呢，一般消化颗粒细胞需要用透明质酸酶消化的，如果没有透明质酸酶也可以用胶原酶（0.1%浓度）代替。胰酶的作用太强烈了，颗粒细胞很脆弱，而且还那么少，受不了胰酶的。