分离PBMC时的疑问？

easternliu

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! C% d* @! Q! t3 y' s* x, Y6 c+ `3 c+ H7 a9 R
sorry，不是针对你，我是指“不会的”这三个字，操作问题也是问题，说不定就是楼主遇到的问题哈。对于新手而言，谈常识有点过了。

easternliu

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# L/ l  |! l' Z3 f2 [: C6 j2 ]9 Y! X% s' Q9 m; d2 F2 n: Z3 J
大侠顺便帮我解决个问题吧http://www.stemcell8.cn/thread-64671-1-1.html

pengxuleo

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9 D, @- {0 `' g- e1 W4 @# o
# N; L! L1 f4 f& o5 X2 Y: i好吧，那我以后回答的时候，写详细点。以后多交流啊

天天天雨雨

若觉得有影响，可以先只吸取明显的白膜层放入一个离心管中，然后下层若有较浑浊有细胞可以单独放入另一个离心管中一起离心，, L% b( h7 D; k4 t/ t# z1 U
我们这样做过，有时候下层的淋巴层有不少细胞，有时候很少便弃掉

cheeray

扩大洗涤液体洗涤。。。你可以多用几只离心管。 这样可以多收集细胞。。。

ljl1988115

这种情况可以适当增加一下离心机的转速

spring1221

回复 gengtongyu521 的帖子: \; W. ]" o$ X# ?1 \& E
% q3 k" S& j5 g; b3 _+ y
除了用PBS洗，用盐水或者1640洗可以吗？

wwxx66

不充分混匀肯定离心效果不好，吸白膜层时尽可能将白膜层洗干净，将白膜层吸出后加入到生理盐水或PBS中，离心前上下翻转一下离心管使其充分混匀，然后2000转，8-10min就可以避免细胞的丢失！/ u2 {0 r, G8 @5 L7 r( a1 G! d; t
你可以将上清液再次倒入新的离心管中再次离心看一下，我就尝试过，混匀充分后，不存在细胞的浪费！

joe_binyang

回复 gengtongyu521 的帖子+ j! u5 \+ D0 v2 H8 {8 w

9 o7 p& c$ B5 j充分混匀稀释液是必须的，分离液是水性的，只要混合充分，一定能溶解扩散，不影响效果

cheeray

如果你怕收集不全。可以收集时多加几个管。