脐带组织块贴壁法求助

湖南干细胞

2.7日贴壁法养了脐带间充质，2.11日可见大量小圆形细胞，换液。2.12可见某角落有少量散在分布贴壁的细胞，求鉴定是否为间充质?

老姜

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) }5 k( x1 W" m+ i- `# q# h0 D污染了！细胞没伸出触角不能扔组织块！7 U9 ]$ d1 O! |; |$ F0 x% j- K$ n/ k
你最好改用培养皿培养好操作。组织块周围见有几十个、上百个细胞组成的集落后再将大的组织块用巴斯德吸管吸弃，碎的组织块不用管，换两次液就没了，即使有几个它也不影响细胞生长。最忌讳将培养器皿倾斜，使组织块流向器皿角落——将贴壁细胞擦脱落。白色物质是什么？不清楚。下两张图是污染了，弃之！

湖南干细胞

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谢谢指点，醍醐灌顶。

湖南干细胞

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以上是2.7号贴壁法培养的细胞，分别是2.12和2.11号的照片，请教是否为间充质细胞？谢谢。

老姜

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左图是间充质细胞，这时组织块还不要扔，等这些梭形细胞成集落状，但不能细胞和细胞接触——大量的细胞间接触，细胞会“老”！降低收获量——再扔组织块。: ?0 m0 Z! E4 o2 W( }+ \: p
右图细胞爬出了，这种细胞中的绝大多数细胞不具有贴壁性，随换液会弃之，但贴壁细胞就在其中，不能摇动培养器皿，否则贴壁细胞不易贴壁或刚贴上被摇下来它不会再贴了。

湖南干细胞

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好的，我要再接再励。

xiaoming210

组织块铺在培养瓶上后倒置贴壁2个小时，两个小时后翻转，加少量FBS15%的培养基，浸没组织块即可，3天后首次换液，以后每3天半量换液一次

硕果累累_555

1cm最适宜，要分布均匀，同时倒置培养，培养液不要过多，不过该法时间较长，不要乱动。

445334587

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剪的不是很碎，尽量剪剪，还有接种是要有间距，细胞生长不会重叠，而且观察也方便。

湖南干细胞

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2 n2 t# B* P  ]$ N7 ^/ K0 {2 p谢谢。