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hunterlee1999

新手上路

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楼主

发表于 2013-3-22 07:56 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

从没养过细胞，现在要用C57BL/6鼠胚胎干细胞提取蛋白，查了一下文献，该细胞无饲养层培养容易分化，如果用饲养层培养，在提取胚胎干细胞时是否会混有胚胎成纤维细胞影响蛋白提取，望告知，谢谢！

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沙发

发表于 2013-3-22 08:37 |只看该作者

肯定会影响。7 d% M5 I# Z! J) p4 s
可以采用差速贴壁法去除饲养层。

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echowdk

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藤椅

发表于 2013-3-22 09:33 |只看该作者

回复 hunterlee1999 的帖子
+ i/ Y: y7 y$ [6 n
就是收干细胞的时候要去一下feeder。feeder（成纤维细胞）的贴壁时间比干细胞的时间短，我们一般是将干细胞和feeder都消化以后，再用培养液重悬至一新的培养皿孔中，如果实验要求特别严谨的话，可以重复一次。