慢病毒感染干细胞怪现象

sizhengliu

最近实验遇到问题，请大家支招！9 L3 f2 \: {/ P7 h
我用慢病毒感染人成体干细胞，96孔板内，设置了3个MOI组（20,100,180），3天后观察荧光，发现2个怪现象，求解释：
/ b% r3 @( Y5 v% L# [. C6 ^8 X1，整体看，荧光率非常低，最好的孔内不会高于50%，有些孔甚至一个视野就1-2个发弱光的。
. w  i: L% v, m+ S8 f8 N2，各MOI组之间的荧光率差别较小，最好的孔与最差的孔可能就相差10%左右。
+ e4 {+ w! f% qplus，我的基因启动子是CMVIE，带zsgreen的。( Q2 A8 O# }7 M) b0 t

yuhaoze

确实很怪

Jonathan

这么高的MOI，按照经验，是应该出现很多死细胞。如果没有的话，就只能说，滴度有问题。还有一个可能，就是病毒包装有问题，没法进入细胞

monk125

是不是病毒失效了

穿越地平线

Jonathan 发表于 2013-3-26 09:54 / Q4 y/ {/ y8 F- @
这么高的MOI，按照经验，是应该出现很多死细胞。如果没有的话，就只能说，滴度有问题。还有一个可能，就是病 ...

  Y- z) {% P5 K同意楼主的说法

穿越地平线

病毒式自己包的还是外包的？

穿越地平线

病毒式自己包的还是外包的？

receiver1

我觉得，只要有荧光，就不是质粒的问题。还是你没感染上。你感染的是什么细胞？如果你的细胞状态养的不好的话，也可能出现这种情况。还有就是你可以把病毒浓缩一下去感染看看怎么样。

ciweiyuan

回复 Jonathan 的帖子+ v" z3 y$ g1 k
+ S  s; n% K, K
同意，很有可能是病毒无法进入细胞，看看细胞的状态

axh

可能病毒保存出了问题，是不是被反复冻融了若干次？# L6 E, z2 Z$ e' _
另外，你滴度是怎么测的，可信么？