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楼主: mayiwaiwai
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干细胞培养污染了吗   [复制链接]

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发表于 2013-4-22 09:19 |只看该作者
回复 mayiwaiwai 的帖子* [4 z$ r( v+ |  r5 v

  A( d( p! ~( P' k- t. n. v1 W$ r或者你可以收集皿里的細胞培養液,做一下支原體檢測,支原體污染是會導致細胞生長緩慢的。
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发表于 2013-4-22 09:50 |只看该作者
貌似是消化过度造成的哦,吹打要轻柔些,否则压力过大也会致使细胞状态不好的。
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发表于 2013-4-22 16:43 |只看该作者
本帖最后由 mayiwaiwai 于 2013-4-22 16:49 编辑
6 X5 B2 w( _- R5 S7 e7 w1 v) y- K, `. p1 r' [: `
回复 [url=forum.php?mod=redirect&goto=findpost&pid=846460&ptid=66988]老姜 的帖子[/u! x0 K) e/ G( c3 V0 w
具体怎么建立起来的不清楚只知道是细胞系的名字,像R1、D3
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发表于 2013-4-23 14:09 |只看该作者
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最近细胞一直污染,有细菌也有酵母的,这些污染很明显,1天最多2天培养液就浑浊,显微镜下可以看到一层絮状的估计是细菌,成群的小葡萄串就是酵母,支原体的话可以测测外边是看不出来的,就用最简单的PCR方法就可以的。听你的描述应该还是细胞本身的的状态不行,冻存前是不是没消化好呢,细胞那个时候就成团了,里面的细胞复苏回来也死了
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发表于 2013-4-23 22:41 |只看该作者
回复 一人日和 的帖子
) c. Y. v: q/ A+ R; o/ k# C# x( ?$ c: ~  p( W& m% O
那些絮状的是会动的,之前没有仔细观察,说明是细菌的污染吧,细菌会从一个孔爬另一个孔么?这次变的严重了,中午复苏的细胞过一下午就可以看的见,是冻存的时候就污染了么?还复苏了之前养的MEF、293也会看到,难道空气传播了么?培养箱之前喷了两天的酒精
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发表于 2013-5-8 14:25 |只看该作者
无污染,估计是机械吹打过度导致细胞损伤。或者就是消化过度。
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发表于 2013-5-10 14:17 |只看该作者
不知道楼主用的什么培养基,是无血清的培养基吗?建议复苏或传代后适量加点血清,对贴壁和终止消化非常好。
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发表于 2013-5-14 12:13 |只看该作者
你好,我觉得是有分化迹象了。我养的时候也出现过这种情况,克隆很圆很容易漂,有点像EB的感觉。我的感觉是正常生长的胚胎干一般不会很圆,克隆形态没这么标准,个人观点,有不对的地方,大家多指点。
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发表于 2013-7-24 16:17 |只看该作者
你这个细胞怎么那么散啊,是不是消化过了,或者吹的太散了,应该是一个个细胞团才对,这样细胞长不好正常
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发表于 2013-8-5 10:41 |只看该作者
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