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楼主: lyj-0017
go

请教CIK培养过程中出现的絮状物问题!!!   [复制链接]

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51楼
发表于 2013-6-17 16:02 |只看该作者
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回复 daifenghao 的帖子2 \. r' G- V& y5 f0 I% X! @
4 z; p" C  r: y  M( ^
同问同问

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52楼
发表于 2013-6-18 09:49 |只看该作者
回复 daifenghao 的帖子2 {* _8 Q; A, D+ S3 Q( o8 @

0 s( h/ R7 j+ h* f4 `7 k你们的血浆经过灭活处理了吗
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53楼
发表于 2013-6-19 08:20 |只看该作者
回复 sunny.yc 的帖子
" k: I, ]" l2 U3 y) c$ n+ g' c9 Q' G. _
实际上,在贴壁过程中就已经出现絮状物了,此时是没有添加细胞因子的。但是,有的细胞确实是在培养后出现絮状物的,可能还是不同人对相同细胞因子的耐受程度不一样吧,还需要多积累经验啊,多谢~
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54楼
发表于 2013-6-19 08:23 |只看该作者
回复 xu_shufen 的帖子
. K0 G5 N: s  F
- |* ?# c+ p& G* F: O  J嗯,我也认为是纤维蛋白类物质引起的,也可能是细胞量过大的原因,血小板的可能不大,因为分离MNC时都是先把白膜层上方大部分液体先吸掉的,血小板剩余量应该不多
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55楼
发表于 2013-6-19 08:25 |只看该作者
回复 daifenghao 的帖子# M+ L( U1 }5 A5 o

' m) Z3 ^9 L4 w9 r+ j: ]- A" s3 p添加进去的应该用血清吧?血浆里面本身就含有大量纤维蛋白,加入血浆后出现絮状物应该在情理之中才对
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56楼
发表于 2013-6-19 08:31 |只看该作者
回复 1179240331 的帖子
+ R$ s4 Z9 ~0 o9 Y! [. q- t! _. y9 T3 k! ^, I5 }
我们现在也在注意血浆物质残留的问题了,分离MNC时也已经严格清洗了,观察一下看看吧。
# J% b, \, ^$ j/ p! x1 h7 ^) {采血要是混合不均匀的话,凝血也会使得分离的MNC量减少吧。. _+ B2 F4 Z/ }6 o+ C
你的意思他们分离出MNC后进行培养时出现细胞团块吗?
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57楼
发表于 2013-6-19 09:09 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子. w% \& b& u( O. B

) A" o/ |6 g. s5 o如果贴壁的时候有絮状物,是不是血浆的问题,你们用的血浆经过灭活处理过的吗?
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58楼
发表于 2013-6-19 11:10 |只看该作者
回复 sunny.yc 的帖子& w2 h+ k' g- O; Z

  |% p7 ], u+ |! `& r9 u我们贴壁的时候只加培养基,没有同时添加血浆(加血浆还是血清?)。, b% s/ p- @" X' y4 o8 `
如果加点白蛋白会不会好点呢?

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59楼
发表于 2013-6-22 12:33 |只看该作者
回复 chenguangyu 的帖子
- S" x8 j5 O/ }5 G* j+ a$ B( i. O4 q) D. p5 m
最近细胞生长的状态如你所说,袋内白膜确实是逐渐自动散开了,并且细胞长势还不错。但是有时候,加液后,原本长得不错的细胞会聚团,像是细胞死掉了聚团?这是什么原因呢?
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60楼
发表于 2013-6-22 12:35 |只看该作者
回复 daifenghao 的帖子
: o2 h' I) j% J: F: E. E  O0 j" {) A/ l9 ?, X8 \* R9 v& N0 y
我现在发现,细胞铺袋后不要摇晃袋,让细胞自己调整,过几天白色丝膜就会自动消失,你们可以观察一下试试
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