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楼主: lyj-0017
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请教CIK培养过程中出现的絮状物问题!!!   [复制链接]

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发表于 2013-6-14 17:31 |只看该作者
细胞图片不清晰,有可能是转袋没有拍散细胞聚集生长,但看着不像,还有一种可能是培养细胞所用器皿或者瓶袋的质量不好,有微量残留造成的。
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发表于 2013-6-14 17:35 |只看该作者
回复 daifenghao 的帖子& t0 Q, }, s! ]% e  X5 ]& w- x6 v( s
' w' R: ~# Q9 s" k) \6 g
没有添加血浆,我们不用血液离心完后的血浆的

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发表于 2013-6-14 17:37 |只看该作者
回复 daifenghao 的帖子; _9 @+ {& t+ y, p) W4 G
( Q: E  }( W9 J& _
会不会是我们分离白膜层之后,清洗细胞不够,导致残留的血浆也一同加入培养袋中了呢?

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发表于 2013-6-14 17:39 |只看该作者
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回复 孙帅帅 的帖子
& G0 W! y  G& M4 O8 Q. }4 M
3 J- K* h% u+ @7 x5 h我知道你说的这种操作,关键是你们是用50-100ml外周血分离MNC,我们是机采分离MNC,机采采集的MNC数量肯定比前者数量要多的多,这两种方式的培养情况肯定不一样的
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发表于 2013-6-14 17:48 |只看该作者
回复 硕果累累_555 的帖子
) ?) c. I& \2 _5 a- E* z. \$ O  g1 F( @3 L" x
我们转袋之前都是把细胞吹散的,会不会是细胞密度太大的缘故呢?
9 O7 c* m, D( @另外,我们用的都是康宁的瓶子,TAKARA的袋子,质量应该没问题吧
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发表于 2013-6-15 11:19 |只看该作者
回复 sunny.yc 的帖子6 ~- Y2 `& J; Y, J9 c8 z
( Y, r7 r0 C' u& p) K6 Q2 T
我们之前也遇到过这个情况,当时是在包被过的培养瓶中,聚团非常大,而且瓶中的散落的细胞几乎没多少了,细胞碎片也比较多,吹打开也没用,过段时间还会重新聚集。
) {- H7 S/ l1 t# j这种情况也咨询过别人,得到的一种答案我觉得还比较靠谱,就是,细胞形成集落了,但我感觉还是细胞受刺激过度。
+ u- G0 r+ ^. n1 D8 ~% [是不是你的细胞因子浓度太高导致的呢?
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发表于 2013-6-15 14:51 |只看该作者
本帖最后由 1179240331 于 2013-6-15 14:55 编辑
" X. a+ P  i+ y
/ y- s3 s( J# }5 Y: e0 M回复 lyj-0017 的帖子
% ]( c, B% ~. @: c8 P% ?9 R. q2 }- W/ c* ^' n9 g
静脉采外周血培养也出现过这种情况,红细胞稍多些,粘连在培养瓶底,吹不散,团块状,像破网,很想知道原因
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发表于 2013-6-15 14:55 |只看该作者
回复 daifenghao 的帖子, ~& [8 O; K! W0 h! A3 W; f

! |1 Q+ `# j( g请问自体血浆吗?是否灭活呢?试过加8%未灭火自体血浆,会成团块

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发表于 2013-6-15 15:32 |只看该作者
回复 1179240331 的帖子' y8 K- B: _$ t8 m

4 e6 X. e1 X' A跟你说的现象一样,MNC贴壁之前都是吹散的,放入培养箱贴壁之后,培养上清中就会出现团块状物质,就是网状粘连,培养袋中底部铺成一层膜。难道就是红细胞过多的原因?或者是分离MNC后,清洗过程还有残留的少量血浆?
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发表于 2013-6-15 15:33 |只看该作者
回复 1179240331 的帖子6 ~) D: r3 C" _% g$ J# j

# {& [6 |! i: B6 w那你们后来如何处理的呢?处理之后情况有所改善吗?
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