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楼主: lyj-0017
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CIK加液后产生絮状物,大家来分析一下原因!!!     [复制链接]

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21楼
发表于 2013-7-9 13:08 |只看该作者
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回复 lyj-0017 的帖子9 Y1 \8 \( u; p6 _# P
0 P9 }! z) X/ b, }( j7 u
你的量是从哪看到的,都太高了吧,试试1000单位的干扰素γ,D0天一般只加干扰素

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22楼
发表于 2013-7-9 20:05 |只看该作者
回复 sunny.yc 的帖子
9 {# L# ]/ b1 Q3 J6 M2 U, {1 F
9 m" m/ G1 x0 e记错了,IFN-r应该是1000U/ml。现在纠结的问题就是到底可不可以D0天三种细胞因子同时加?与传统工艺效果哪个更好一些。。。
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23楼
发表于 2013-7-10 14:36 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子9 }' }+ I, g6 h) Z  e
$ ~1 n+ t* X, }
建议还是分开加,挺多文献都有这样的描述,而且理论看起来都很合理的; M* @7 C% _, D. u! h8 d
* v7 l/ x  q5 Z" A
如果你还是在纠结的话,建议你连续做几个平行实验看看,可能对于你的培养体系来说,D0加一种或加三种影响不大呢
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24楼
发表于 2013-7-10 22:40 |只看该作者
回复 sunny.yc 的帖子
6 l  b" A1 y/ F2 ~6 S  a1 k- E
. @) X3 U% b* Y( b+ q* U# x最近看文献看到有这么做的,D0天添加IFN-r和anti-CD3 mAb,第二天添加IL-2,后续培养以IFN-r和IL-2维持,按文献所说扩增倍数还挺高的~
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25楼
发表于 2013-7-11 10:40 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子" L8 _/ U  C  P. h8 L
( L, @6 L3 r0 |# W; q: F/ I2 _8 x
可能我了解得还太少,持续加干扰素还是第一次听到,试试看吧!

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26楼
发表于 2013-7-24 13:13 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子' V+ V7 l3 @2 z) y

9 T+ _: |; R8 O4 ^" J  _8 `$ ^不知你们的培养体系有多大?一般用多少预热多少,而且预热的时间也不长,不会出现很大的酸碱失衡吧
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27楼
发表于 2013-7-24 13:48 |只看该作者
回复 jenvy121 的帖子
0 I9 K, {$ Q5 ?* t$ ]1 E5 [) T- g5 z4 |% Q1 {
培养体系得看分离得到的单个核细胞数量,根据5~10X10^5/ml的细胞密度铺袋。你后面说的预热多少没看懂,应该是问预热多少培养基吧?一般预热一瓶培养基,培养基手感不那么凉即可添加。酸碱失衡我觉得不可避免,但是不会出现太大失衡~
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28楼
发表于 2013-7-24 13:55 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子9 H* {" \( y5 n8 }$ A; h

% A, y. o0 S: x- n  ?1 D% \8 P* P/ U对的,我们每次换液计算好用的培养基的量,然后预热
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29楼
发表于 2013-7-24 20:03 |只看该作者
回复 jenvy121 的帖子
- o# U3 N% b1 G# o- v
0 u6 C+ }3 x! u2 v你们用的是机采吗?还是直接采外周血?现在培养一次最多能获得多少细胞呢?
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30楼
发表于 2013-7-25 09:27 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子
2 U3 W' T  s( l- e& N8 S4 ]
' q$ `% _+ |6 m! L% _0 z直接采外周血,数量也是因人而异吧
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