如何验证蛋白是否进入细胞核，用immunocytochemistry，DAPI,ISH???

luyue6453

回复 Andyhigh 的帖子$ E  t. T/ p$ Z, N# o

1 J* D2 H4 C/ v) W我做过原位荧光杂交，说起来也比较容易，当时失败率还是很高的，你首先将细胞收集起来做核型分析，最好细胞处在分裂中期，这样染色体很好看，然后将这些片子放在四度冰箱放染色体降解，之后你用罗氏的试剂盒做探针，按照试剂盒做就可以了，然后再与片子杂交，这个过程中注意事项很多，你研究研究，最后DAPI染色就可以观察了，一下子就能定位到时候在染色体上。你要是觉得麻烦，你最好外包吧，有很多公司帮忙做这个！

Andyhigh

好的，谢谢啊！ 很需要这方面的信息
, V; K& F# h  _; l0 i% d# f  ?/ Z- j7 }& X, _! l7 K
最近有些人也在推荐我外包一些试验，看到我了
4 S. l- a% q, A6 }% S. C$ s
7 P" L/ {" T% T1 F' ~: a+ ~" q7 x" v可能后面还要请教你呢，谢了！！！

Andyhigh

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! i* `' v: D1 B+ l+ F; H3 Y7 l% \# U  b! n5 Y& ^
好的，谢谢啊！ 到时候估计还要请教你···

妖妖空

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) P6 j$ g% I; p2 o
. c7 m) A6 \$ b( s0 I# J这个我也不是很清楚的，都是实验室的技术员在做这些东西，我们只看最后的结果，自己的最后观察时用的是430nm激光激发GFP，受体的YFP接受CFP激发转移的能量，能看到530nm的荧光。